UA68906A - Method for preparing equivalent of skin consisting in culturing viable keratinocytes in vitro onto collagenous gel substrate - Google Patents
Method for preparing equivalent of skin consisting in culturing viable keratinocytes in vitro onto collagenous gel substrate Download PDFInfo
- Publication number
- UA68906A UA68906A UA20031110351A UA20031110351A UA68906A UA 68906 A UA68906 A UA 68906A UA 20031110351 A UA20031110351 A UA 20031110351A UA 20031110351 A UA20031110351 A UA 20031110351A UA 68906 A UA68906 A UA 68906A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- keratinocytes
- gel substrate
- preparing
- skin consisting
- viable keratinocytes
- Prior art date
Links
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 title claims abstract description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 title abstract 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title abstract 2
- 239000000512 collagen gel Substances 0.000 claims description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 5
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 206010056340 Diabetic ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000976737 Zeugodacus tau Species 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 108010007093 dispase Proteins 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 229920006254 polymer film Polymers 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Пропонований спосіб відноситься до біології, а саме до біотехнології, і може бути використаний для 2 лікування шкірних дефектів різної етіології.The proposed method refers to biology, namely to biotechnology, and can be used for 2 treatment of skin defects of different etiology.
Для лікування різних шкірних дефектів, таких як опіки, трофічні і діабетичні виразки, післяопераційні рани, застосовуються способи, засновані на трансплантації культивованих іп мійго кератиноцитів |1, 2, 51.For the treatment of various skin defects, such as burns, trophic and diabetic ulcers, postoperative wounds, methods based on the transplantation of cultured human keratinocytes are used |1, 2, 51.
Найбільш близьким аналогом пропонованого способу є спосіб готування еквівалента шкіри з використанням культивованих іп міго кератиноцитів, перенесених на підкладки, що складаються з полімерних плівок різного 70 типу ІЗ). В основі методу - одержання кератиноцитів шкіри за стандартною методикою з використанням трипсину і діспази і культивування їх в умовах іп мйго з використанням бессироваткова живильного середовищаThe closest analogue of the proposed method is the method of preparing a skin equivalent using cultured human keratinocytes transferred to substrates consisting of polymer films of various 70 types (IZ). The basis of the method is the production of keratinocytes of the skin according to the standard method using trypsin and dispase and their cultivation in the conditions of ip mygo using a serum-free nutrient medium
Кегайпосуїе ОСгоулп Меадішт. Для переносу на плівки використовують кератиноцити 1, 2 і З пасажів. Плівки являють собою комерційні полімерні ранові покриття Орзіїе, Орзіге ІМ 3000, Отідетгт, Тедадегт, Віобгапе.Kegayposuie OSgoulp Meadisht. Keratinocytes of passages 1, 2 and 3 are used for transfer to films. Films are commercial polymer wound coverings Orziye, Orzige IM 3000, Otidetgt, Tedadegt, Viobgape.
Недоліками даного способу є непроникність застосовуваних плівок для мікроскопії, що утрудняє контроль 72 клітинної культури, токсичний ефект різного ступеня, що робиться плівками на клітинну культуру. Крім того, полімери, застосовувані для виготовлення підкладок є синтетичними і не надають стимулюючого впливу на процес репарації та не можуть бути піддані біодеградації.The disadvantages of this method are the impermeability of the used films for microscopy, which makes it difficult to control 72 cell culture, the toxic effect of varying degrees, which is made by films on cell culture. In addition, the polymers used for the production of substrates are synthetic and do not have a stimulating effect on the repair process and cannot be subjected to biodegradation.
В основу пропонованого способу поставлена задача спростити візуальну оцінку стану культури, виключити токсичний вплив, що робиться застосовуваними підкладками на культивовані клітки, замінити синтетичний матеріал на більш фізіологічний, що піддається біодеградації.The proposed method is based on the task of simplifying the visual assessment of the state of the culture, eliminating the toxic effect of the applied substrates on cultured cells, and replacing the synthetic material with a more physiological one that is subject to biodegradation.
Поставлена задача зважується за рахунок виготовлення підкладки з колагенового гелю. Колагеновий гель має достатній ступінь прозорості для візуального контролю клітинної культури і не робить токсичного впливу на культивовані клітки. Колаген у нормі зустрічається в людському організмі і може бути підданий повної біодеградації у рані. Крім того, колаген 1-го типу, як основна складова частина гелю, бере участь у підготовці ранового ложа, регулює хімічний склад рані, сприяє міграції і проліферації кліток, бере участь у « новотворі капілярів, запобігає рубцюванню.The set task is weighted due to the production of a collagen gel substrate. Collagen gel has a sufficient degree of transparency for visual control of cell culture and does not have a toxic effect on cultured cells. Collagen is normally found in the human body and can be subjected to complete biodegradation in the wound. In addition, type 1 collagen, as the main component of the gel, participates in the preparation of the wound bed, regulates the chemical composition of the wound, promotes cell migration and proliferation, participates in capillary neoplasia, and prevents scarring.
Спосіб використовується таким чином.The method is used as follows.
Виготовлення колагенового гелю роблять за стандартною методикою |4). Всі операції роблять на крижаній лазні. Готовий гель при температурі 37"С приймає желеобразну консистенцію через 20-40 хвилин. Одержання ее, культури кератиноцитів здійснюється стандартним способом |1, 2). Для переносу на колагеновий гель ав використовуються кератиноцити 1-3 пасажів. Суспензію кератиноцитів у живильному середовищі наносять на колагеновий гель із рахунку 25-БОтис. клітин на їсм? колагенового гелю. Кератиноцити, нанесені на підкладку, Ф культивують у СО? інкубаторі в стандартних умовах не менш 1 доби. сProduction of collagen gel is done according to the standard method |4). All operations are performed in an ice bath. The finished gel at a temperature of 37"C takes on a jelly-like consistency after 20-40 minutes. The keratinocyte culture is obtained by the standard method |1, 2). Keratinocytes of 1-3 passages are used for transfer to collagen gel av. A suspension of keratinocytes in a nutrient medium is applied to collagen gel from the count of 25 thousand cells per serving of collagen gel. Keratinocytes applied to the substrate are cultured in a CO incubator under standard conditions for at least 1 day.
Джерела інформації прийняті до уваги: с 1. Васильєв А.В., Логинов Л.П., Смирнов С.В. и др. применение вьіращенньїх аллогенньїх зпидермальньмх пластов для лечения обожженньмх. / Травматология и ортопедия Росии. -1994. -Мо1. - С.34-39., 2. Малахов С.Ф., Парамонов Б.А., Емельянов А.В. и др. Новье подходьії Кк лечению тяжельх ожогов: трансплантация вніращенньх в культуре кератиноцитов. /Военно-медицинский журнал. -Мо9. -1997. -С.16-19., « 20 З. Апагем/ б. Тау, Рпап Тоап Тпапд аї аі. Сийигей зибсопіїсепі Кегайпосуїез оп тоцпа роїутег агезвіпд іп -оSources of information taken into account: p 1. Vasiliev A.V., Loginov L.P., Smirnov S.V. etc. the use of grown allogeneic epidermal layers for the treatment of burns. / Traumatology and orthopedics of Russia. -1994. -Mo1. - P.34-39., 2. Malakhov S.F., Paramonov B.A., Emelyanov A.V. et al. New approaches to the treatment of severe burns: transplantation of cultured keratinocytes. /Military Medical Journal. -Mo9. -1997. - P. 16-19., " 20 Z. Apagem/ b. Tau, Rpap Toap Tpapd ai ai. Siyigei zibsopiisepi Kegaiposuiez op totspa roiuteg agesvipd ip -o
Ше Ігеагтепі ої рбитв апа спгопіс моцпав. / Муоипав. - 2000. - 12(5). - Р.123-129. с 4. Веї/ Е., ЕНгісп Н.Р., ВишШе 0О.9., Масаївигі Т. іміпуд їізвце їогптей іп мйго апа ассерієй аз 5Кіп :з» едиімаепі і(ізвце ої ТцІ (піскпезв. / Зсіепсе. -1981. -Мої. 211. -Мо4486. -Р. 1052-1054. 5. Ооппегетагк с.Н., МийіІрацег МУ. Ебї ам Оіе Мепмепдипуд омоп о КегайпогуїепКкийигеп іп о дег 415 ЗспугегргапамегіеїлЛепрепапанпо - бБівзпегіде Епапгипдеп, А!йзвбБісКе 2иг мейегеп Епіміскіипо./ Оптгайспігига. бо -1995. -98. -Р. 229-232. (ее)She Igeagtepi oi rbitv apa spgopis motspav. / Muoipav - 2000. - 12(5). - R.123-129. with 4. Vei/ E., Engisp N.R., VyshShe 0O.9., Masayivigi T. imipud yiizvce yogptei ip mygo apa asseryey az 5Kip :z» ediimaepi i(izvce oi TcI (piskpezv. / Zsiepse. -1981. -Moi. 211. -Mo4486. -R. 1052-1054. 5. Ooppegetagk S.N., MiyiIraceg MU. Ebi am Oie Mepmepdipud omop o KegaypoguiepKkiyigep ip o deg 415 Zspugegrgapamegieil Leprepapanpo - bBivzpegide Epapgypdep, A!yigegiBibisep. Optgayspigyga. bo -1995. -98. -R. 229-232. (ee)
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA20031110351A UA68906A (en) | 2003-11-17 | 2003-11-17 | Method for preparing equivalent of skin consisting in culturing viable keratinocytes in vitro onto collagenous gel substrate |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA20031110351A UA68906A (en) | 2003-11-17 | 2003-11-17 | Method for preparing equivalent of skin consisting in culturing viable keratinocytes in vitro onto collagenous gel substrate |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA68906A true UA68906A (en) | 2004-08-16 |
Family
ID=34512099
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA20031110351A UA68906A (en) | 2003-11-17 | 2003-11-17 | Method for preparing equivalent of skin consisting in culturing viable keratinocytes in vitro onto collagenous gel substrate |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA68906A (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2342164C2 (en) * | 2006-04-03 | 2008-12-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Центр клеточных технологий" | Skin equivalent and method for its production |
-
2003
- 2003-11-17 UA UA20031110351A patent/UA68906A/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2342164C2 (en) * | 2006-04-03 | 2008-12-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Центр клеточных технологий" | Skin equivalent and method for its production |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nayak et al. | Skin equivalent tissue-engineered construct: co-cultured fibroblasts/keratinocytes on 3D matrices of sericin hope cocoons | |
| US10550366B2 (en) | Thermoresponsive cell culture supports | |
| Wang et al. | Investigating the effect of chitosan/polycaprolactone blends in differentiation of corneal endothelial cells and extracellular matrix compositions | |
| Serban et al. | Effects of extracellular matrix analogues on primary human fibroblast behavior | |
| CN109072179A (en) | Cell culture medium, cultural method and organoid | |
| US20110052693A1 (en) | Method for producing artificial skin | |
| Ahearne et al. | Influence of cell and collagen concentration on the cell–matrix mechanical relationship in a corneal stroma wound healing model | |
| US20050124062A1 (en) | Milk protein biofilm and uses thereof | |
| DK3072535T3 (en) | METHOD OF RECONSTRUCTION OF SKIN | |
| Li et al. | In vitro biomimetic platforms featuring a perfusion system and 3D spheroid culture promote the construction of tissue-engineered corneal endothelial layers | |
| Paquette et al. | Production of tissue-engineered three-dimensional human bronchial models | |
| Wang et al. | The phenotypic response of bovine corneal endothelial cells on chitosan/polycaprolactone blends | |
| UA68906A (en) | Method for preparing equivalent of skin consisting in culturing viable keratinocytes in vitro onto collagenous gel substrate | |
| Lai | Effect of chemical composition on corneal cellular response to photopolymerized materials comprising 2-hydroxyethyl methacrylate and acrylic acid | |
| US11414645B2 (en) | Thermoresponsive cell culture supports | |
| KR20120029402A (en) | Method for producing a coated cell culture carrier | |
| Shved et al. | Interaction of cultured skin cells with the polylactide matrix coved with different collagen structural isoforms | |
| KR101652427B1 (en) | Cell culture substrate with ZnO thin film formed by atomic layer deposition | |
| CN120796173B (en) | Method for constructing ordered structure skin-like tissue with assistance of magnetic field | |
| KR100536478B1 (en) | Biodegradable collagen film used for artificial organs and method for preparing same | |
| CN105169484A (en) | Cell transplantation culture method for forming bone tissue in vivo | |
| JPWO2015046315A1 (en) | Cell culture method | |
| TWI515024B (en) | Chitosan-biodegradable polymer blending composition and use thereof | |
| RU2571215C2 (en) | Cell culture matrix | |
| CN114181902B (en) | Simple, convenient and rapid astrocyte differentiation method |