TW201623604A - 培養容器 - Google Patents
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Abstract
本發明之培養容器含有培養室，該培養室具有底面、及設置於上述底面之周緣的周側壁面，於上述培養室內，沿著上述周緣環繞設置有特定高度之障壁面，上述障壁面以如下方式形成：使上述底面上之較上述周緣更內側之內部周緣作為基礎端上升，朝向上述周側壁面，且形成與上述周側壁面之邊界。
Description
本發明係關於一種培養容器。更具體而言，本發明係關於一種具有抗彎液面效果之培養容器。本案係基於2014年9月25日於日本申請之日本專利特願2014-195164號並主張優先權，並將其內容引用於本文中。
當加入培養溶液至培養容器內之情形時，因溶液之界面張力之作用而於界面產生凹形之彎液面。尤其於培養時使用凝膠之情況，由於凝膠化前之溶液之黏性較高而溶液易附著於培養容器之內壁面，因此該傾向變得更明顯。於觀察培養面時，在形成彎液面的部分形成陰影，因此妨礙存在於該部分之培養細胞之觀察。
作為用以解決彎液面之問題之技術，於日本特開2001-340070號公報(專利文獻1)中揭示有一種細胞培養器，其特徵在於：於培養容器底面具有層A且於層A上重疊地具有層B，該層A含有來自活體之物質，且因加溫而變成凝膠狀態之溶液以未凝膠化狀態冷凍而成，該層B係由不會因加溫而變成凝膠狀態之水溶液冷凍而成。
[專利文獻1]日本特開2001-340070號公報
習知之用以解決彎液面之問題的技術係藉由「發揮降低或防止彎液面之產生本身的作用」此手段而完成。
另一方面，本發明之目的在於提供一種允許彎液面之產生，並且可解決彎液面之問題的培養容器。
本發明人進行潛心研究，結果發現藉由使培養容器具有「將彎液面設置在應培養及觀察之範圍之外側」的構造，可達成上述本發明之目的，從而完成了本發明。
(1)
本發明之培養容器含有培養室，該培養室具有底面、及設置於該底面之周緣的周側壁面。於培養室內，沿著底面之周緣環繞設置有障壁面。障壁面係以如下方式形成：使底面上之較周緣更內側之內部周緣作為基礎端上升，朝向周側壁面，且形成與周側壁面之邊界。
藉由以於在較周緣更內側而隔開之位置存在內部周緣之方式構成，而至少降低當培養室內收容有培養液時產生之彎液面的影響。障壁面被設定在可形成如下程度差距的高度：抑制障壁面上之細胞殘留之程度。
根據上述構成，可減少於因培養液面產生彎液面而變得難以觀察之培
養室內的周緣部分存在培養細胞的情況。因此，儘管允許產生彎液面，但可擴大已培養之細胞的觀察範圍。
(2)
亦可為，自橫向剖視時障壁面之形狀為直線、曲線、及直線與曲線之組合的任一種。
如此，允許各種形狀之障壁面變寬。
(3)
較佳為，自橫向剖視時，障壁面係由自內部周緣上升之下側障壁面部、及與該下部障壁面部連接設置且形成與周側壁面之邊界的上側障壁面部構成，自內部周緣上升之下側障壁面部與底面成90度以上且150度以下之角度。
藉由下側障壁面部之該角度為90度以上，可不遮擋培養室內之除周緣部分以外之部分的視野而擴大集中之培養細胞之觀察範圍，並且藉由為150度以下，而可進一步減少培養細胞進入難以觀察到的培養室內之周緣部分。
(4)
於上述(3)之培養容器中，亦可為，自橫向剖視時，將彼此為相同斜率之下側障壁面部與上側障壁面部無邊界地連接設置。
於此情形時，障壁面之構造簡單，就製造上之觀點而言亦較佳。
(5)
當自橫向剖視時障壁面之形狀為曲線時，該曲線較佳為如下形狀：切
線與上述底面所成之角度自底面側朝向周側壁面側變大之形狀。即，亦可為如下形狀：自橫向(相對於底面平行之方向)剖視時障壁面之形狀為曲線，該曲線為曲線之切線與底面所成之角度自底面側朝向周側壁面側逐漸變大之形狀。
於此情形時，較佳地確保培養細胞不存在於難以觀察到的培養室內之周緣部分，並且就製造上之觀點而言亦較佳。
(6)
周側壁面及內部周椽之俯視形狀可為圓，於此情形時，內部周緣之直徑可為30mm以上且170mm以下。
藉由內部周緣之直徑為30mm以上，而可較佳地獲取用於培養及觀察之底面上之空間，且藉由為170mm以下，而可較佳地享有將已培養之細胞大部分集中於可觀察到之部分的效果。
根據本發明，可提供一種即便產生彎液面，因該彎液面而形成之陰影亦不會妨礙培養細胞之觀察的培養容器。
100、1001‧‧‧培養容器
200‧‧‧底面
300、300b、300d‧‧‧周側壁面
400、400a、400b、400c、400d、400e、400f、400g、400h、400i、400j、400k‧‧‧障壁面
410、410f、410g、410h、410j、410k‧‧‧下側障壁面部
420、420d、420e、420f、420g、420h、420j、420k‧‧‧上側障壁面部
O、B‧‧‧(底面之)周緣
B2、B2a‧‧‧(底面之)內部周緣
B3、B3b、B3d‧‧‧(障壁面與周側壁面之)邊界
C‧‧‧培養室
θ 1‧‧‧(下側障壁面部與底面所成之)角度
θ、θ'、θ"‧‧‧(障壁面之剖面形狀之切線與底面所成之)角度
圖1表示第1實施形態之培養容器之示意性外觀立體圖。
圖2表示第1實施形態之培養容器使用時的示意性剖面圖。
圖3表示圖2之示意性剖面圖之局部放大圖。
圖4表示圖2之示意性剖面圖之要部放大圖。
圖5表示第1實施形態之第1變形例之培養容器使用時的示意性剖面圖。
圖6表示第1實施形態之第2變形例之培養容器使用時的示意性剖面圖。
圖7表示第1實施形態之第3變形例之培養容器使用時的示意性剖面圖。
圖8表示第1實施形態之第4變形例之培養容器使用時的示意性剖面圖。
圖9表示第1實施形態之第5變形例之培養容器使用時的示意性剖面圖。
圖10表示第2實施形態之培養容器之要部放大圖。
圖11表示第3實施形態之培養容器之要部放大圖。
圖12表示第4實施形態之培養容器之要部放大圖。
圖13表示第5實施形態之培養容器之要部放大圖。
圖14表示第6實施形態之培養容器之要部放大圖。
圖15表示第7實施形態之培養容器之要部放大圖。
圖16表示第8實施形態之培養容器之示意性外觀立體圖。
圖17係於實施例1中製成之培養容器加入培養基後上下方向觀察之照片。
圖18係於實施例1中製成之培養容器內進行細胞培養後上下方向觀察之照片(局部放大)。
圖19係於實施例1中製成之培養容器內進行細胞培養後上下方向觀察
之照片(局部放大)。
圖20係於實施例2中製成之培養容器加入培養基後上下方向觀察之照片。
圖21係於實施例2中製成之培養容器內進行細胞培養後之下方向觀察之照片(局部放大)。
圖22係於實施例2中製成之培養容器內進行細胞培養後上下方向觀察之照片(局部放大)。
圖23表示比較例1中製成之培養容器之示意性剖面圖。
圖24係於比較例1中製成之培養容器中加入培養基後上下方向觀察之照片。
圖25係於比較例1中製成之培養容器內進行細胞培養後上下方向觀察之照片(局部放大)。
圖26係於比較例1中製成之培養容器內進行細胞培養後上下方向觀察之照片(局部放大)。
以下，一面參照圖式，一面對本發明之實施形態進行說明。於以下之說明中，對相同之要素標註相同之符號，只要未作特別說明，則其等之名稱及功能亦相同。因此，基本上不重複對其等之詳細說明。
[第1實施形態]
圖1表示第1實施形態之培養容器之示意性外觀立體圖。圖2表示第1實施形態之培養容器之使用時示意性剖面圖。圖2之示意性剖面圖係自橫
向觀察以包含圖1之A-A線之鉛垂面切斷之面之圖。圖3表示圖2之示意性剖面圖之局部放大。圖4表示圖2之示意性剖面圖之要部(圓圈部分)之放大圖。再者，為了方便說明，將各圖式之上側稱為上，將下側稱為下。
如圖1及圖2所示，培養容器100含有底面200、周側壁面300及障壁面400作為構成其內側之面。由該等底面200、周側壁面300及障壁面400界定培養室C。換言之，本實施形態之培養容器含有培養室C，該培養室C具備底面200、沿著底面200之周緣B2設置於外側之障壁面400、及沿著障壁面400之周緣設置於更外側之周側壁面300。
底面200於上下方向觀察為圓形，且如圖3所示，設置有自該底面200之周緣O之全周上升且上方開口之周側壁面300。沿著底面200之周緣O之全周以特定高度h環繞設置之障壁面400係以如下方式形成：使自底面200之周緣O向內側隔開特定距離w之內部周緣B2作為基礎端而上升，朝向周側壁面300，且於特定高度h之位置形成與周側壁面300之邊界B3。
如圖3所示，特定距離w相當於周緣O與內部周緣B2之距離。特定高度h相當於周緣O與邊界B3之距離，且設定為可構成藉由與特定距離w之關係而抑制細胞殘留於障壁面400之形狀。於本實施形態中設定為：成為應收容於培養室C內之培養液之最低水位H以下。
於培養液面S產生彎液面M之情形時，培養室C之周緣部分之培養液面S因彎液面M現象而成為曲面狀，因此自上下方向觀察之視野於該部分變得難以觀察。於培養容器100，藉由設置自內部周緣B2上升之特定高度h之障壁面400，而阻止培養細胞自內部周緣B2向障壁面400
側移動，藉由使障壁面400自內部周緣B2朝向外方向且使內部周緣B2與周側壁面300隔開特定距離w，而使產生彎液面M之部分之至少一部分設置在內部周緣B2外。因此，儘管允許彎液面M之產生，但可使已培養之細胞的大部分存在於可觀察到之內部周緣B2內部。
藉由障壁面400具有相當於特定距離w之寬度，而至少降低於培養室C內收容有培養液時產生於培養液面S之彎液面M的影響。因此，該特定距離w並無特別限定。例如，存在特定距離w越大，越能進一步降低彎液面M之影響之傾向，並且存在特定距離w越小，越可充分獲取用於培養及觀察之底面200上之空間之傾向，業者可基於該等兩種傾向而適當決定。作為具體例，特定距離w可為2mm以上且3mm以下。於本實施形態中，就避免彎液面M之影響之觀點而言，特定距離w被設定為彎液面M之寬度W以上。
特定高度h只要設定為可構成如下差距即可，因此並無特別限定，該差距係藉由與特定距離w之關係而抑制細胞殘留於障壁面400之差距。例如，特定高度h為1mm以上且21mm以下，較佳為1mm以上且15mm以下。藉由為上述下限值以上，而可更為減少培養細胞滲入上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分，並且藉由為上述上限值以下，而可充分獲取應收容培養液之容積。於本實施形態中，就更充分地獲取應收容培養液之容積之觀點而言，特定高度h被設定在應收容於培養室C內之培養液之水位H以下。於此情形時，培養液面S與培養容器100之內壁面之邊界E處於周側壁面300上。
如圖4所示，障壁面400由下側障壁面部410及上側障壁面
部420構成。下側障壁面部410係以與底面200成角度θ 1之方式將內部周緣B2作為基礎端上升，並於高度h1之位置與上側障壁面部420連接設置。於高度h1之位置，下側障壁面部410與上側障壁面部420之邊界形成脊線。上側障壁面部420相對於底面200呈角度θ 2地向周側壁面300傾斜，並且與周側壁面300形成邊界B3。
下側障壁面部410與底面200形成之角度θ 1為90度。藉此，可有效地防止底面200中之培養細胞超過內部周緣B2而向外側移動。作為上側障壁面部420之傾斜角之角度θ 2並無特別限定。例如存在如下傾向：角度θ 2越大，越可充分確保下側障壁面部410之高度h1，而更為減少培養細胞滲入“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分”之傾向；角度θ 2越小，越可充分獲取應收容培養液之容積之傾向；業者可基於該等兩種傾向而適當決定。
下側障壁面部410之高度h1並無特別限定。例如存在如下傾向：高度h1越大，則更加減少“培養細胞滲入上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分”之傾向；高度h1越小，越可充分獲取應收容培養液之容積之傾向，業者可基於該等兩種傾向而適當決定。具體而言，高度h1例如可設定為0.5mm，亦可設定為1mm。
內部周緣B2之直徑可與習知之培養容器之內底面之直徑相同。例如為30mm以上且170mm以下，較佳為32mm以上且90mm以下。藉由為上述下限值以上，而可較佳地獲取用以培養及觀察之底面200上之空間，並且藉由為上述上限值以下，而可較佳地享有將已培養之細胞之大部分集中於可觀察到之部分的效果。
培養容器100可由具有透明性之原材料構成。作為具有透明性之原材料，可列舉以玻璃及石英為代表之無機物、以及以合成樹脂為代表之有機物。作為合成樹脂，可列舉聚苯乙烯(PS)、聚丙烯(PP)、聚甲基戊烯(PMP)、聚碳酸酯(PC)、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚甲基丙烯酸甲醯亞胺(PMMI)、及環烯共聚物(COC)等聚合物。進而，亦可列舉由該等聚合物中2個以上之單體單元合成之共聚物。於為合成樹脂之情形時，就容易成形且不易破裂之方面而言較佳。
培養容器100可為一體成形之構造體，亦可為由例如構成底面200之構件與構成周側壁面300及障壁面400之構件之組合而形成之構造體。為由構件之組合而形成之構造體時，各個構件亦可由不同之原材料構成。
就物理性、化學性及/或生物化學觀點而言，亦可對培養容器100之底面200、周側壁面300及障壁面400實施表面處理。只要為業者，則可適當選擇此種表面處理。例如，亦可對障壁面400、或對障壁面400及周側壁面300實施用以妨礙細胞培養之表面處理。
進而，亦可根據培養容器100之使用目的等，設置未圖示之更多附加構造。只要為業者，則可適當選擇此種附加構造。具體而言，可列舉用以使培養室C成為加蓋狀態之蓋體、用以間隔內容物之間隔件及用以特定出內容物(尤其為細胞群)之量及位置之網格圖案等設置於底面200之引導構造。
<變形例>
培養容器100除已圖示者以外還被允許有各種變形例。於變形例中，
只要彎液面M之至少一部分設置在較內部周緣B2更外側即可，因此只要邊界E不形成於障壁面400中下側障壁面410上，則可允許為任何構造，該下側障壁面410為將內部周緣B2作為基礎端並相對於底面200呈90度上升者。即，於變形例中，當已收容培養液至培養室C內時，只要以培養液之液面S與培養容器100之內壁之邊界E成為較內部周緣B2更外側之方式構成即可。
以下，列舉圖5至圖9，對特定距離w及特定高度h之組合不同的第1實施形態之變形例進行說明。圖5至圖9對應於第1實施形態之圖3。於以下之變形例中，主要對與第1實施形態不同之方面進行說明，省略相同方面之說明。
[第1變形例]
圖5表示第1實施形態之第1變形例。圖5所示之培養容器100a之障壁面400a，係藉由將特定距離wa設定為短於第1實施形態之特定距離w，而使基礎端即內部周緣B2a處於較第1實施形態之內部周緣B2更外側。藉此，設置在較內部周緣B2a更外側之彎液面M成為該障壁面400a之一部分，可降低因彎液面M所致之影響。即，於本變形例中，因彎液面M設置在較內部周緣B2a更外側，因此亦可降低因彎液面M所致之影響。
[第2變形例]
圖6表示第1實施形態之第2變形例。圖6所示之培養容器100b之障壁面400b係藉由將特定高度hb設定為大於第1實施形態之特定高度h，而使與周側壁面300b之邊界B3b處於較第1實施形態之邊界B3更上側。藉此，可更為減少培養細胞滲入“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2
之外側部分”。於本變形例中，特定高度hb成為應收容於培養室C內之培養液之水位H以上，但未達培養液面S與周側壁面300b之邊界E之高度。
[第3變形例]
圖7表示第1實施形態之第3變形例。圖7所示之培養容器100c之障壁面400c與第1變形例同樣地，係藉由將特定距離wa設定為短於第1實施形態之特定距離w，而使基礎端即內部周緣B2a處於較第1實施形態之內部周緣B2更外側。藉此，設置在較內部周緣B2a更外側之彎液面M成為該障壁面400c之一部分，可降低因彎液面M所致之影響。即，於本變形例中，因彎液面M設置在較內部周緣B2a更外側，因此亦可降低因彎液面M所致之影響。
進而，與第2變形例同樣地，障壁面400c與周側壁面300b之邊界B3b處於較第1實施形態之邊界B3更上側。藉此，可更為減少培養細胞滲入“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2a之外側部分”。於本變形例中，特定高度hb成為應收容於培養室C內之培養液之水位H以上，但未達培養液面S與周側壁面300b之邊界E之高度。
[第4變形例]
圖8表示第1實施形態之第4變形例。圖8所示之培養容器100d之障壁面400d，係藉由將特定高度hd設定為更大於第2變形例之特定高度hb，而使與周側壁面300d之邊界B3d處於較第2變形例之邊界B3b進而更上側。藉此，可進一步減少培養細胞滲入“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分”。
於本變形例中，培養液面S與培養容器100d之內壁面之邊
界Ed處於上側周側壁面部420d上，因此障壁面400d之特定高度hd超過應收容於培養室C內之培養液之水位H且為邊界Ed之高度以上。但是，由於設置有足夠量之特定距離w，因此可使彎液面M設置在內部周緣B2之外側，而可避免彎液面M之影響。
[第5變形例]
圖9表示第1實施形態之第5變形例。與第4變形例同樣地，圖9所示之培養容器100e之障壁面400e，係藉由將特定高度hd設定為更大於第2、第3變形例之特定高度hb，而使與周側壁面300d之邊界B3d處於較第2、第3變形例之邊界B3b進而更上側。藉此，可更為減少培養細胞滲入“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2a之外側部分”。
於本變形例中，培養液面S與培養容器100e之內壁面之邊界Ee處於上側周側壁面部420e上，因此障壁面400e之特定高度hd超過應收容於培養室C內之培養液之水位H且為邊界Ee之高度以上。進而，與第1變形例同樣地，藉由將特定距離wa設定為短於第1實施形態之特定距離w，而使基礎端即內部周緣B2a處於較第1實施形態之內部周緣B2更外側。藉此，設置在較內部周緣B2a更外側之彎液面M成為該障壁面400e之一部分，可降低因彎液面M所致之影響。即，於本變形例中，因彎液面M設置在較內部周緣B2a更靠外側，因此亦可降低因彎液面M所致之影響。
<其他實施形態>
於本發明中，障壁面400只要具有自橫向剖視時通過內部周緣B2與邊界B3之間之形狀(連接內部周緣B2與邊界B3之形狀)即可，並不限定於第1實施形態所示之形狀。例如，下側障壁面部410與上側障壁面部420
之邊界可如圖4所示般形成脊線，亦可對該邊界進行C倒角加工或R倒角加工。
進而，障壁面400之自橫向觀察之剖面形狀可為直線，亦可為曲線，還可為直線與曲線之組合，廣泛允許為各種形狀。就更確實地使培養細胞不存在於上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分之觀點而言，障壁面400較佳為如下形狀：自橫向剖視時連結內部周緣B2與邊界B3之直線、或存在於該直線上方之形狀。
以下，列舉圖10至圖15對障壁面400之形狀與第1實施形態不同之第2實施形態至第7實施形態進行說明。圖10至圖15對應於第1實施形態之圖4。於以下之實施形態中，主要對與第1實施形態之不同點進行說明，省略有關相同點之說明。
[第2實施形態]
圖10表示第2實施形態之培養容器之要部放大圖。圖10所示之障壁面400f係由下側障壁面部410f及上側障壁面部420f構成。下側障壁面部410f以與底面200呈角度θ 1(90度)之方式將內部周緣B2作為基礎端上升，並與和底面200平行(角度θ 2為180度)之上側障壁面部420f連接設置。再者，圖10中，下側障壁面部410f與上側障壁面部420f之邊界形成脊線，但亦可對該邊界進行C倒角加工或R倒角加工。
[第3實施形態]
圖11表示第3實施形態之培養容器之要部放大圖。圖11所示之障壁面400g係由下側障壁面部410g及上側障壁面部420g構成。下側障壁面部410g以與底面200呈角度θ 1之方式將內部周緣B2作為基礎端上升，並與和底
面200平行(角度θ 2為180度)之上側障壁面部420g連接設置。
於本實施形態中，角度θ 1可超過90度且為150度以下。藉由超過該下限值，而自上下方向觀察時，可視野良好地觀察應培養及觀察之內部周緣B2內之整個區域，藉由為該上限值以下，而可減少培養細胞進入“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分”。再者，圖11中，下側障壁面部410g與上側障壁面部420g之邊界形成脊線，但亦可對該邊界進行C倒角加工或R倒角加工。
[第4實施形態]
圖12表示第4實施形態之培養容器之要部放大圖。圖12所示之障壁面400h係由下側障壁面部410h及上側障壁面部420h構成。下側障壁面部410h與底面200所成之角度θ 1、和上側障壁面部420h與底面200所成之角度θ 2相同，因此兩面無邊界地連接設置。因此，障壁面400h之構造簡單，就製造上之觀點而言較佳。
[第5實施形態]
圖13表示第5實施形態之培養容器之要部放大圖。圖13所示之障壁面400i之自橫向觀察之剖面形狀為曲面。該曲面之切線與底面200所成之角度θ、θ'、θ"自底面200之側朝向周側壁面300之側逐漸變大(θ<θ'<θ")。藉此，可更確實地使培養細胞不存在於“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分”，並且障壁面400i之構造本身亦簡單，就製造上之觀點而言較佳。再者，可使角度θ、θ'、θ"於90度以上180度以下之範圍變化。
[第6實施形態]
圖14表示第6實施形態之培養容器之要部放大圖。圖14所示之障壁面400j係由下側障壁面部410j及上側障壁面部420j構成。下側障壁面部410j之自橫向觀察之剖面形狀為直線，以與底面200呈角度θ 1之方式將內部周緣B2作為基礎端上升，且於高度h1之位置與該剖面形狀為曲線之上側障壁面部420j連接設置。於高度h1之位置，下側障壁面部410j與上側障壁面部420j之邊界形成脊線。
於本實施形態中，角度θ 1亦可為90度以上且150度以下。藉由為該下限值以上，而自上下方向觀察時，可視野良好地觀察應培養及觀察之內部周緣B2內之整個區域，且藉由為該上限值以下，而可更確實地使培養細胞不存在於“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分”。上側障壁面部420j之剖面形狀亦可為與第5實施形態中之障壁面400i相同之曲面。
[第7實施形態]
圖15表示第7實施形態之培養容器之要部放大圖。圖15所示之障壁面400k係由下側障壁面部410k及上側障壁面部420k構成。下側障壁面部410k係以與底面200呈角度θ 1之方式將內部周緣B2作為基礎端而上升，且於高度h1之位置與上側障壁面部420k連接設置。於高度h1之位置，下側障壁面部410k與上側障壁面部420k之邊界形成脊線。上側障壁面部420k相對於底面200以角度θ 2向周側壁面300傾斜，且與周側壁面300形成邊界B3。
於本實施形態中，角度θ 1亦可為90度以上且150度以下。藉由為該下限值以上，而自上下方向觀察時，可視野良好地觀察應培養及
觀察之內部周緣B2內之整個區域，藉由為該上限值以下，而可減少培養細胞進入“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分”。
角度θ 2並無特別限定。例如存在如下傾向：角度θ 2越大，越可充分確保下側障壁商部410k之高度h1，而減少培養細胞進入“上下方向觀察時難以觀察到之內部周緣B2之外側部分”；角度θ 2越小，越可充分獲取應收容培養液之容積；業者可基於該等兩種傾向而適當決定。
再者，圖15中，下側障壁面部410k與上側障壁面部420k之邊界形成脊線，但亦可對該邊界進行C倒角加工或R倒角加工。
<變形例>
再者，於上述第2至第7實施形態中，均與第1實施形態同樣地可允許有變形例。即，只要彎液面M(參照圖3至圖9)之至少一部分設置在較內部周緣B2靠外側即可，因此只要邊界E(參照圖3至圖9)未形成於障壁面400f、400g、400h、400i、400j、400k中之下側障壁面410f、410j上，該下側障壁面410f、410j為將內部周緣B2作為基礎端並相對於底面200呈90度上升者，則可允許為任意構造。即，於變形例中，只要以如下方式構成即可：於已收容培養液至培養室C(參照圖3至圖9)內時，培養液之液面S(參照圖3至圖9)與培養容器之內壁之邊界E成為較內部周緣B2更外側。
[第8實施形態]
圖16係第8實施形態之培養容器之示意性外觀立體圖。培養容器1001具有多個培養室C。於本實施形態中，1個培養容器1001具有6個培養室C，但培養室C之數量並不限定於此。例如存在如下傾向：培養室C之數量越
多，越可較佳地享有將已培養之細胞之大部分集中於可觀察之部分的效果；藉由某種程度地限定培養室C之數量，而可適當地獲取用於培養及觀察之底面200上之空間，業者可基於上述情形而適當決定培養室C之數量。作為培養容器1001之培養室C之構造，可應用第1實施形態至第7實施形態以及其等之變形例之任一者中之構造。
[實施例]
以下示出實施例來具體地說明本發明，但本發明並不限制於下述實施例。
<實施例1>
藉由將聚苯乙烯之圓板貼合於使用聚碳酸酯之切削加工品(對無蓋無底圓筒之內周面側進行切削加工而成者)，而製作具有圖9所記載之構造之培養容器之試作品(再者，培養容器之正式製品亦可藉由一體成形而製作。以下，將藉由貼合而製作成之試作品亦簡稱為「培養容器」)。θ 1為90度，θ 2為120度。
於製成之培養容器之培養室添加含10%血清之培養基3mL，自上下方向觀察培養室。圖17表示上下方向觀察照片。如圖17所示，培養容器具有障壁面400e，因此彎液面M之大部分於內部周緣B2a之外側產生，由此可確認於用於培養及觀察之內部周緣B2a之內部可良好地視認之範圍較下述比較例1擴大。
於製成之培養容器之培養室添加含10%血清之培養基3mL及人類纖維母細胞38.4萬個，之後於37℃、5%CO2之條件下培養24小時，利用倍率40倍之顯微鏡觀察培養室中央部及周邊部。圖18表示培養室中央
部之顯微鏡觀察照片，圖19表示培養室周邊部之顯微鏡觀察照片。如圖18所示，可確認細胞正常接著於底面200。又，如圖19所示，可確認因障壁面400e而彎液面M之大部分於內部周緣B2a之外側產生，於用於培養及觀察之內部周緣B2a之內部可觀察之範圍較下述比較例1擴大。
<實施例2>
藉由將聚苯乙烯之圓板貼合於使用聚碳酸酯之切削加工品(對無蓋無底圓筒之內周面側進行切削加工而成者)，而製作具有圖9所記載之構造之培養容器之試作品。本實施例之培養容器除θ 2為150度以外，與實施例1之培養容器相同。
於製成之培養容器之培養室添加含10%血清之培養基3mL，自上下方向觀察培養室。圖20表示上下方向觀察之照片。如圖20所示，可確認培養容器因具有障壁面400e，而因彎液面M形成之陰影於內部周緣B2a之外側產生，於用於培養及觀察之內部周緣B2a之內部可良好地視認之範圍較下述比較例1擴大。
於製成之培養容器之培養室添加含10%血清之培養基3mL及人類纖維母細胞38.4萬個，之後於37℃、5%CO2之條件下培養24小時，利用倍率40倍之顯微鏡觀察培養室中央部及周邊部。圖21表示培養室中央部之顯微鏡觀察照片，圖22表示培養室周邊部之顯微鏡觀察照片。如圖21所示，可確認細胞正常接著於底面200。又，如圖22所示，可確認因障壁面400e而彎液面M之大部分於內部周緣B2a之外側產生，於用於培養及觀察之內部周緣B2a之內部可觀察之範圍較下述比較例1擴大。
若將實施例1與本實施例2之培養室周邊部之顯微鏡觀察照
片(圖19及圖22)進行比較，則可確認實施例2(圖22)中可良好地視認細胞之範圍更廣。於本實施例2中，培養液面S與培養容器100e之內壁面之邊界Ee位於上側周側壁面部420e上，進而，障壁面400e之特定高度hd低於收容於培養室C內之培養液之水位H且亦低於邊界E之高度。因此，與θ 2為120度之實施例1相比，θ 2為150度之本實施例2中於內部周緣B2a之外側產生之彎液面M之範圍變得更大，本實施例2(圖22)中可良好地視認細胞之範圍變得更廣。
<比較例1>
藉由將聚苯乙烯之圓板貼合於聚碳酸酯之無蓋無底圓筒，而製作不具有障壁面之培養容器。將該培養容器之示意性剖面圖示於圖23。
於製成之培養容器之培養室添加含10%血清之培養基3mL，自上下方向觀察培養室。圖24表示上下方向觀察之照片。如圖24所示，彎液面M全部於周緣B之內側產生，於用於培養及觀察之周緣B之內部確認到因彎液面M形成之陰影。
於製成之培養容器之培養室添加含10%血清之培養基3mL及人類纖維母細胞38.4萬個，之後於37℃、5%CO2之條件下培養24小時，利用倍率40倍之顯微鏡觀察培養室中央部及周邊部。圖25表示培養室中央部之顯微鏡觀察照片，圖26表示培養室周邊部之顯微鏡觀察照片。如圖25所示，可確認細胞正常接著於底面200。又，如圖26所示，可確認彎液面M全部於周緣B之內側產生，於用於培養及觀察之周緣B之內部產生因彎液面M形成之陰影，難以觀察周緣B附近之細胞，於用於培養及觀察之周緣B之內部可觀察之範圍較窄。
[第1實施形態至第8實施形態中之各部與請求項之各構成要素之對應關係]
於本發明中，培養容器100、1001相當於「培養容器」，底面200相當於「底面」，周側壁面300、300b、300d相當於「周側壁面」，障壁面400、400a、400b、400c、400d、400e、400f、400g、400h、400i、400j、400k相當於「障壁面」，下側障壁面部410、410f、410g、410h、410j、410k相當於「下側障壁面部」，上側障壁面部420、420d、420e、420f、420g、420h、420j、420k相當於「上側障壁面部」，周緣O相當於「周緣」，內部周緣B2、B2a相當於「內部周緣」，邊界B3、B3b、B3d相當於(障壁面與周側壁面之)「邊界」，培養室C相當於「培養室」，角度θ 1相當於(下側障壁面部與底面所成之)「角度」，角度θ、θ'、θ"相當於(障壁面之剖面形狀之切線與底面所成之)「角度」。
本發明之較佳之實施形態如上所述，但本發明並不僅限定於該等實施形態，存在其他不脫離本發明之主旨及範圍之各種實施形態。進而，於本實施形態中敍述之作用及效果為一例，並非限定本發明。
[產業上之可利用性]
根據本發明，可提供一種即便產生彎液面，因該彎液面而形成之陰影亦不會妨礙培養細胞之觀察之培養容器。
100‧‧‧培養容器
200‧‧‧底面
300‧‧‧周側壁面
400‧‧‧障壁面
B2‧‧‧(底面之)內部周緣
B3‧‧‧(障壁面與周側壁面之)邊界
C‧‧‧培養室
Claims (6)
- 一種培養容器，其含有培養室，該培養室具有底面、及設置於上述底面之周緣的周側壁面，於上述培養室內，沿著上述周緣環繞設置有特定高度之障壁面，上述障壁面係以如下方式形成：使上述底面上之較上述周緣更內側之內部周緣作為基礎端上升，朝向上述周側壁面，且形成與上述周側壁面之邊界。
- 如申請專利範圍第1項之培養容器，其中，自橫向剖視時上述障壁面之形狀為直線、曲線、及直線與曲線之組合的任一種。
- 如申請專利範圍第1或2項之培養容器，其中，自橫向剖視時，上述障壁面由自上述內部周緣上升之下側障壁面部、及與上述下部障壁面部連接設置且形成與上述周側壁面之邊界之上側障壁面部構成，自上述內部周緣上升之下側障壁面部與上述底面成90度以上且150度以下之角度。
- 如申請專利範圍第3項之培養容器，其中，自橫向剖視時，彼此為相同斜率之上述下側障壁面部與上述上側障壁面部無邊界地連接設置。
- 如申請專利範圍第2項之培養容器，其中，上述剖面觀察下之上述障壁面之形狀為曲線，上述曲線之切線與上述底面所成之角度自上述底面側朝向上述周側壁面側逐漸變大。
- 如申請專利範圍第1至5項中任一項之培養容器，其中，上述周側壁面及上述內部周緣之俯視形狀為圓，上述內部周緣之直徑為30mm以上且170mm以下。
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