ES2976784T3 - Derivados de fenil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il-etan-1-ona como moduladores alostéricos positivos del receptor de dopamina D1 - Google Patents

Derivados de fenil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il-etan-1-ona como moduladores alostéricos positivos del receptor de dopamina D1 Download PDF

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Abstract

La invención proporciona ciertos compuestos relacionados con (fenil)-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il)etan-1-ona de fórmula I como moduladores alostéricos positivos (PAM) D1, y composiciones farmacéuticas de los mismos. La invención proporciona además métodos para usar un compuesto de fórmula I para tratar ciertos síntomas de trastornos dopaminérgicos del SNC que incluyen la enfermedad de Parkinson, la esquizofrenia, el TDAH o la enfermedad de Alzheimer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Derivados de fenil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il-etan-1-ona como moduladores alostéricos positivos del receptor de dopamina D1
La invención proporciona determinados compuestos relacionados con fenil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il)etan-1-ona, composiciones farmacéuticas de los mismos, y los compuestos para su uso en procedimientos para el tratamiento de trastornos dopaminérgicos del CNS, incluyendo la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, la esquizofrenia y el trastorno por déficit de atención con hiperactividad (ADHD).
Muchos fármacos utilizados actualmente actúan directa o indirectamente a través de los receptores de dopamina. Entre ellos figuran los agonistas dopaminérgicos y el precursor dopaminérgico L-DOPA para la enfermedad de Parkinson, los liberadores dopaminérgicos para el trastorno por déficit de atención y la narcolepsia, y los inhibidores de la recaptación de dopamina para la depresión. El receptor D1 tiene un papel importante en la actividad motora y la recompensa, y un papel especial en el mantenimiento de las funciones cognitivas superiores de memoria de trabajo, atención y funciones ejecutivas (Amsten AF, Cereb. Cortex (2013) 123, 2269-2281). Los intentos de desarrollar agonistas D1 para su uso clínico no han tenido éxito hasta ahora, lo que ha impulsado la búsqueda de enfoques alternativos para aumentar la actividad del receptor D1.
Uno de estos enfoques consiste en identificar un potenciador alostérico, también conocido como modulador alostérico positivo o PAM, del receptor D 1 de dopamina. (Svensson K, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. (2017) 360:117-128). Los moduladores alostéricos son agentes que ya sea potencian (modulador alostérico positivo o PAM) o inhiben (modulador alostérico negativo o NAM) el efecto del ligando natural al unirse a un sitio distinto del sitio de unión ortostérico del receptor (el sitio de unión alostérico). Al aumentar la afinidad de la dopamina por el receptor D1, un potenciador D1 puede amplificar la respuesta a la dopamina endógena, aumentando el tono D1 cuando y donde se libera dopamina. Este modo de actividad contrasta con un agonista D1, que activará todos los receptores D1 a los que tenga acceso mientras esté presente. En modelos animales de cognición y actividad locomotora, los agonistas D1 muestran relaciones dosis-respuesta en forma de campana, que probablemente se deban a una sobreestimulación a dosis más altas. Algunos agonistas D1 también muestran un rápido desarrollo de tolerancia debido a la activación constante del receptor D1. En cambio, como un potenciador D1 dependería del tono endógeno y estaría sujeto a un control de retroalimentación normal, podría tener una propensión mucho menor a la sobreestimulación. Dada la implicación de la dopamina y la señalización del receptor D1 en estas funciones del sistema nervioso central, un potenciador D1 que pueda aumentar la actividad del receptor D1 puede proporcionar un agente alternativo y/o mejorado para el tratamiento de determinadas enfermedades relacionadas con la dopamina.
La enfermedad de Parkinson es un trastorno neurodegenerativo crónico y progresivo caracterizado por la pérdida de neuronas dopaminérgicas en el cerebro. La enfermedad de Parkinson se manifiesta con temblor en reposo junto con otros síntomas motores (por ejemplo, bradicinesia e inestabilidad postural) y no motores (por ejemplo, deterioro cognitivo, trastornos del sueño y depresión). Las terapias actuales para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson incluyen la administración de precursores dopaminérgicos no selectivos, tales como la levodopa, y agonistas de los receptores dopaminérgicos. Los tratamientos con agonistas de los receptores dopaminérgicos de acción directa también pueden asociarse a trastornos del control de los impulsos, psicosis y empeoramiento de la cognición, debido a su afinidad relativamente mayor por los receptores d 2. La esquizofrenia es una enfermedad debilitante con mecanismos patológicos complejos. Un componente de la esquizofrenia es el deterioro cognitivo, que puede estar asociado a una deficiencia en la activación del receptor D1 o a la regulación a la baja del receptor D1. Se ha planteado la hipótesis de que la activación de D1, selectiva frente a la modulación de D2, puede ser eficaz en el tratamiento del deterioro cognitivo asociado a la esquizofrenia. La enfermedad de Alzheimer es un trastorno neurodegenerativo crónico y progresivo que se caracteriza por la pérdida de neuronas y sinapsis en la corteza cerebral y determinadas regiones subcorticales. La progresión de la enfermedad incluye el deterioro cognitivo, que, según la hipótesis, se debe, al menos en parte, a la reducción de la activación del receptor D1; de tal forma que la activación de D1 puede proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento del deterioro cognitivo asociado a la enfermedad de Alzheimer. El ADHD es un trastorno del neurodesarrollo caracterizado por dificultades para centrar la atención, actividad excesiva o dificultad para controlar el comportamiento propio de la edad de la persona. La hipótesis es que la activación de D1 puede proporcionar beneficios terapéuticos en el tratamiento del ADHD. Por tanto, sigue existiendo una importante necesidad insatisfecha de tratamientos seguros y eficaces de los trastornos del deterioro cognitivo u otros trastornos neurológicos asociados a la esquizofrenia, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer y/o el ADHD, tales como moduladores alostéricos positivos del receptor D1 de la dopamina (PAM D1) alternativos y/o mejorados.
El documento WO 2014/193781 recita determinados compuestos de 3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il como D1 PAM para el tratamiento del deterioro cognitivo asociado a la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, la esquizofrenia, la depresión o el ADHD.
La presente invención proporciona determinados compuestos novedosos que son PAM selectivos del receptor de dopamina 1 (D1) y demuestran una combinación ventajosa de propiedades farmacológicas, tales como potenciación de la señalización del receptor D1 humano en respuesta a la dopamina, alta disponibilidad oral in vivo y eficacia in vivo en la activación locomotora de animales habituados al entorno. Como tales, se cree que los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, la esquizofrenia y/o el ADHD. Los compuestos de la presente invención pueden proporcionar un tratamiento alternativo para tales trastornos. La invención se define en el juego de reivindicaciones adjunto. La presente invención proporciona un compuesto de fórmula I:
en la que:
R1 es
R2 es -F o -Cl;
R3 es -F o -Cl; y
R4 es H o F;
siempre que cuando R1 sea
entonces R4 sea -F.
Los compuestos de fórmula I son particularmente útiles en los compuestos para su uso en procedimientos de tratamiento de la invención, pero se prefieren determinadas configuraciones. En los párrafos siguientes se describen tales configuraciones preferentes. Aunque la presente invención tal como se reivindica en la temula I contempla todos los enantiómeros y diasterómeros individuales, así como las mezclas de los enantiómeros de dichos compuestos, incluyendo los racematos, es particularmente preferente el compuesto con la configuración absoluta como se representa a continuación: Se entiende que estas preferencias son aplicables a los compuestos para su uso en procedimientos de tratamiento y a los nuevos compuestos de la invención.
Una realización particular de la fórmula I es un compuesto de fórmula la:
en la que:
R1 es
R2 es -F o -Cl;
R3 es -F o -Cl; y
R4 es H o F;
siempre que cuando R1 sea
entonces R4 sea -F.
Una realización particular de fórmula I es un compuesto de fórmula Ib:
que en la forma de base libre también puede denominarse 2-(2-cloro-6-fluoro-fenN)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etanona.
Además, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula I, Ia y/o Ib y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
Las siguientes realizaciones particulares son compuestos de fórmula I o Ia.
La presente invención proporciona un compuesto que es
La presente invención proporciona un compuesto que es:
La presente invención proporciona un compuesto que es
La presente invención proporciona un compuesto que es:
La presente invención proporciona un compuesto que es:
La presente invención proporciona un compuesto que es:
La presente invención proporciona un compuesto que es:
La presente invención proporciona un compuesto que es:
La presente invención proporciona un compuesto que es:
La presente invención proporciona un compuesto que es:
Además, la presente invención proporciona un compuesto de una de las realizaciones particulares de la lista precedente inmediatamente anterior, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. Por ejemplo, se contemplan cocristales para las realizaciones de compuestos descritas en la presente memoria.
Los compuestos de la presente invención son PAM selectivos del receptor de dopamina 1 (D1) con actividad mínima en el receptor de dopamina 2 (D2). Los compuestos de la presente invención pueden proporcionar además sus beneficios terapéuticos evitando los riesgos de interacciones farmacológicas. Como tales, se cree que los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de afecciones en las que la actividad reducida de D1 desempeña un papel, y la activación de D2 es indeseable, tal como la enfermedad de Parkinson y la Esquizofrenia, incluyendo el alivio de determinados síntomas asociados, tales como los síntomas motores y el deterioro cognitivo asociados con la enfermedad de Parkinson y el deterioro cognitivo y los síntomas negativos asociados con la esquizofrenia, como por ejemplo el deterioro cognitivo leve o la demencia. También se cree que los compuestos de la presente invención son útiles para mejorar los síntomas motores en la enfermedad de Parkinson como monoterapia o en combinación con otras terapias. También se cree que los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento de determinados síntomas de la enfermedad de Alzheimer tales como el deterioro cognitivo, como por ejemplo el deterioro cognitivo leve. Además se cree que los compuestos de la presente invención son útiles para tratar determinados síntomas del ADHD. También se cree que los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento de trastornos dopaminérgicos del CNS que incluyen la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, la demencia por cuerpos de Lewy (LBD), la demencia vascular, la esquizofrenia, el ADHD, la depresión, el autismo, el dolor musculoesquelético crónico, fibromialgia, trastornos del deterioro cognitivo, trastornos del sueño, somnolencia diurna excesiva, narcolepsia, trastorno por turnos de trabajo, lesión cerebral traumática, encefalopatía traumática crónica, obesidad y regulación del apetito, trastornos del estado de ánimo, letargo, apatía y trastornos de adicción.
Además, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I, para su uso en un procedimiento de terapia. Además, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula Ia, para su uso en un procedimiento de terapia. Además, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula Ib, para su uso en un procedimiento de terapia.
En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula I, Ia o Ib, y uno o más portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. Además, este aspecto de la invención proporciona una composición farmacéutica para su uso en un procedimiento para tratar la enfermedad de Parkinson, como por ejemplo, el deterioro cognitivo asociado con la enfermedad de Parkinson, que comprende el compuesto de fórmula I, Ia o Ib, y uno o más excipientes, portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables. En otra realización de este aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica para su uso en un procedimiento para mitigar el deterioro motor asociado con la enfermedad de Parkinson, que comprende un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, y uno o más excipientes, portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables.
En otra realización de este aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica para su uso en un procedimiento para tratar la enfermedad de Alzheimer, como por ejemplo mitigar el deterioro cognitivo asociado con la enfermedad de Alzheimer, que comprende un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, y uno o más excipientes, portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables.
Otra realización de este aspecto de la invención proporciona una composición farmacéutica para su uso en un procedimiento para tratar la esquizofrenia, como por ejemplo mitigar el deterioro cognitivo asociado con la esquizofrenia, que comprende el compuesto de fórmula I, Ia o Ib, y uno o más excipientes, portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables.
Otra realización de la presente invención proporciona una composición farmacéutica para su uso en un procedimiento para tratar el ADHD, que comprende el compuesto de fórmula I, Ia o Ib, y uno o más excipientes, portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables.
En una realización de este aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, para su uso en un procedimiento para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. En una realización particular, la invención proporciona un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, para su uso en un procedimiento para el tratamiento del deterioro cognitivo asociado a la enfermedad de Parkinson. En otra realización particular, la invención proporciona un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, para su uso en un procedimiento para mitigar el deterioro motor asociado con la enfermedad de Parkinson.
Además, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, para su uso en un procedimiento para el tratamiento de la Esquizofrenia, como por ejemplo en el tratamiento del deterioro cognitivo asociado a la Esquizofrenia.
Además, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, para su uso en un procedimiento para el tratamiento del ADHD.
Además, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, para su uso en un procedimiento para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, como por ejemplo en el tratamiento del deterioro cognitivo asociado a la enfermedad de Alzheimer.
Aunque es posible administrar los compuestos empleados en los procedimientos directamente sin ninguna formulación, los compuestos se administran normalmente en forma de composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de fórmula I, Ia o Ib, como ingrediente activo y al menos un portador, diluyente y/o excipiente farmacéuticamente aceptable. Estas composiciones pueden administrarse mediante una variedad de vías que incluyen oral, sublingual, nasal, subcutánea, intravenosa e intramuscular. Tales composiciones farmacéuticas y los procedimientos para prepararlas son bien conocidos en la técnica. Véase, por ejemplo Remington: The Science and Practice of Pharmacy (University of the Sciences in Philadelphia, ed., 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins Co., 2005).
Las composiciones se formulan preferentemente en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada dosificación desde aproximadamente 0,5 a aproximadamente 800 mg del ingrediente activo. El término "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, cada unidad contiene una cantidad predeterminada de material activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con al menos un portador, diluyente y/o excipiente farmacéuticamente aceptable adecuado. Se entenderá que la cantidad del compuesto realmente administrado será determinada por un médico, a la luz de las circunstancias pertinentes, incluyendo la afección que se va a tratar, la vía de administración elegida, el compuesto o compuestos realmente administrados, la edad, el peso y la respuesta del paciente individual, y la gravedad de los síntomas del paciente. Se contempla que el compuesto de la invención, como por ejemplo en una composición farmacéutica de la invención, se utilice para tratar la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson y/o la esquizofrenia, como por ejemplo el tratamiento del deterioro cognitivo leve asociado a estas enfermedades, mediante administración crónica.
Un compuesto de la presente invención puede usarse en combinación con otros fármacos utilizados en el tratamiento o la mejora de un trastorno dopaminérgico del CNS. Tal(es) otro(s) fármaco(s) puede(n) administrarse, por una vía y en una cantidad comúnmente utilizadas para ello, contemporánea o secuencialmente con un compuesto de la presente invención. Por ejemplo otros ingredientes activos efectivos en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson que pueden combinarse con un compuesto de la presente invención, incluyen, pero no se limitan a: (a) precursores de la dopamina, tales como la levodopa; la melevodopa y la etilevodopa; b) agonistas dopaminérgicos, incluidos pramipexol, ropinirol, apomorfina, rotigotina, bromocriptina, cabergolina y pergolida, c) inhibidores de la monoaminooxidasa, incluidos selegilina y rasagilina (d) inhibidores de la COMT, incluidos la tolcapona y la entacapona, (e) inhibidores de la acetilcolina esterasa, incluidos la rivastigmina y el donepezilo, (f) antidepresivos, incluidos la sertralina, el citalopram, la mirtazapina y la trazodona. Además, por ejemplo, otros ingredientes activos eficaces en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer que pueden combinarse con un compuesto de la presente invención, incluyen, pero no se limitan a: inhibidores de la acetilcolinesterasa incluyendo rivastigmina y donepezilo, un antagonista NMDA incluyendo memantina, determinados fármacos antipsicóticos incluyendo risperidona, quetiapina, aripiprazol, olanzapina y pimavanserina, y antidepresivos incluyendo sertralina, citalopram, mirtazapina y trazodona.
Como se utiliza en la presente memoria, el término "paciente" se refiere a un mamífero, como por ejemplo un humano, que necesita tratamiento para un trastorno o enfermedad. Un ser humano es un paciente preferido. Como se utiliza en la presente memoria, los pacientes que van a ser tratados por los compuestos de la presente invención sufren de un trastorno dopaminérgico del CNS, y como tal comparten aspectos etiofatológicos en que se sabe que las alteraciones de la señalización de la dopamina contribuyen a estas enfermedades. Como se utilizan en la presente memoria, los trastornos dopaminérgicos del CNS incluyen la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, la demencia por cuerpos de Lewy (LBD), la demencia vascular, la esquizofrenia, el ADHD, la depresión, el autismo, el dolor musculoesquelético crónico, la fibromialgia, los trastornos del deterioro cognitivo, trastornos del sueño, somnolencia diurna excesiva, narcolepsia, trastorno por turnos de trabajo, lesión cerebral traumática, encefalopatía traumática crónica, obesidad y regulación del apetito, trastornos del estado de ánimo, letargo, apatía y trastornos de adicción. La identificación de los pacientes con estos trastornos dopaminérgicos del CNS puede lograrse mediante procedimientos establecidos conocidos para el experto.
Un compuesto de fórmula I, Ia o Ib puede utilizarse en combinación simultánea, separada o secuencial con un precursor de dopamina en el tratamiento de un trastorno dopaminérgico en un paciente. Por ejemplo, un compuesto de fórmula I, Ia o Ib puede utilizarse en combinación simultánea, separada o secuencial con un precursor de dopamina en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson en un paciente.
Un compuesto de fórmula I, Ia o Ib puede utilizarse en combinación simultánea, separada o secuencial con un precursor de la dopamina en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer en un paciente.
Un compuesto de fórmula I, Ia o Ib puede utilizarse en combinación simultánea, separada o secuencial con un agonista de dopamina en el tratamiento de un trastorno dopaminérgico en un paciente. Por ejemplo, un compuesto de fórmula I, Ia o Ib puede utilizarse en combinación simultánea, separada o secuencial con un agonista de dopamina en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson en un paciente.
Un compuesto de fórmula I, Ia o Ib puede utilizarse en combinación simultánea, separada o secuencial con un agonista de dopamina en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer en un paciente.
En realizaciones de la invención, un paciente es un ser humano al que se le ha diagnosticado un riesgo, afección o trastorno médico, tal como un trastorno dopaminérgico del CNS, que necesita tratamiento con un régimen de dosificación descrito en la presente memoria. En aquellos casos en los que los trastornos que pueden tratarse con los procedimientos divulgados se conocen mediante clasificaciones establecidas y aceptadas, tales como la AD, la PD o la LBD, sus clasificaciones pueden encontrarse en diversos textos médicos bien conocidos. Por ejemplo, en la actualidad, la 5a edición del Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders (DSM-5), proporciona una herramienta diagnóstica para identificar muchos de los trastornos descritos en la presente memoria. Asimismo, la International Classification of Diseases, décima Revisión (ICD-10) proporciona clasificaciones para muchos de los trastornos descritos en la presente memoria. El experto reconocerá que existen nomenclaturas, nosologías y sistemas de clasificación alternativos para los trastornos descritos en la presente memoria, incluidos los descritos en el DSM-5 y la CIE-10, y que la terminología y los sistemas de clasificación evolucionan con el progreso científico médico. El deterioro cognitivo en sujetos con enfermedad de Parkinson se conoce comúnmente como trastorno neurocognitivo. Los criterios diagnósticos del DSM-5 (5a edición del Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders) describen la evidencia de un deterioro cognitivo significativo respecto a un nivel previo de rendimiento (preocupación del individuo o del informante documentada mediante pruebas neuropsicológicas), y los déficits cognitivos pueden o no interferir con la independencia en las actividades cotidianas. Se califica de trastorno neurocognitivo mayor o leve. "Pérdida de peso", como se utiliza en la presente memoria, se refiere a una reducción del peso corporal, y/o al control crónico del peso en el que el tratamiento promueve el mantenimiento del peso corporal dentro de un intervalo deseado.
Los términos "tratamiento" y "que trata", o "mitigación", como se utilizan en la presente memoria, se refieren a todos los procedimientos en los que se puede ralentizar, interrumpir, detener, controlar o parar la progresión de un trastorno existente y/o sus síntomas, pero no indican necesariamente la eliminación total de todos los síntomas. Como se utiliza en la presente memoria, el término "cantidad eficaz" de un compuesto de fórmula I, Ia o Ib se refiere a una cantidad, es decir, una dosificación, que es eficaz para potenciar una respuesta mediada por dopamina en un paciente. Una "cantidad eficaz" preferida puede determinarse como una cantidad que puede promover un estado de vigilia o alerta en el paciente en comparación con el paciente cuando no recibe tratamiento. Para determinar una cantidad o dosis eficaz de un compuesto de fórmula I, Ia o Ib, se tienen en cuenta una serie de factores, incluidos, pero sin limitar a, el compuesto que se va a administrar y su formulación particular; el tamaño, la edad y el estado general de salud del paciente; el grado de afectación o la gravedad del trastorno; la respuesta de cada paciente; el modo de administración; y otras circunstancias relevantes.
Las abreviaturas utilizadas en la presente memoria se definen como sigue:
"Bn" se refiere a bencilo.
"CAS#" se refiere al número del Chemical Abstracts Registry.
"crotilo" se refiere al bu-2-en-1-ilo.
"CNS" se refiere al sistema nervioso central.
"1D-NOESY" se refiere a la espectroscopia de RMN unidimensional de efecto Nuclear Overhauser. "DCM" se refiere a diclorometano o cloruro de metileno.
"DIPEA" se refiere a N, N-diisopropiletilamina.
"DMSO-d6" se refiere al dimetilsulfóxido totalmente deuterado.
"ee" se refiere al exceso enantiomérico.
"ESMS" se refiere a la espectrometría de masas por electrospray.
"EtOAc" se refiere a acetato de etilo.
"h" se refiere a hora u horas.
"HATU" se refiere al 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-6]piridinio 3-oxid hexafluorofosfato o N-[(dimetilamino)-'/H-'/,2,3-triazolo-[4,5-£)]piridin-1-ilmetileno]-N-metilmetanaminiohexafluorofosfatoN-óxido.
"HPLC" se refiere a la cromatografía líquida de alto rendimiento.
"LAH" se refiere al hidruro de litio y aluminio.
"MeOH" se refiere al metanol o alcohol metílico.
"min" se refiere a minuto o minutos.
"RMN" se refiere a la espectroscopia de resonancia magnética nuclear.
"PG" se refiere al grupo de protección.
"Ph" se refiere a fenilo.
"OAc" se refiere a acetato.
"rac-" se refiere a racémico o racemato.
"RT" se refiere a temperatura ambiente o temperatura ambiente.
"SFC" se refiere a la cromatografía de fluidos supercríticos.
"TBDMS" se refiere al tert-butildimetilsililo.
"TBDPS" se refiere a tert-butildifenilsililo.
"THF" se refiere a tetrahidrofurano.
'V ' se refiere al tiempo de retención.
"p/p" se refiere a peso por peso o peso por peso como unidad de masa.
"% en peso" se refiere a porcentaje en peso.
"Z" se refiere a benciloxicarbonilo, -C(O)OCH2Ph, como grupo protector
Química general
Los compuestos de la presente invención pueden prepararse por procedimientos generales conocidos y apreciados en la técnica o por procedimientos descritos en la presente memoria. Las condiciones de reacción adecuadas para las etapas de estos esquemas son muy conocidas en la técnica y las sustituciones apropiadas de disolventes y coreactivos están dentro de la habilidad de la técnica. Del mismo modo, los expertos en la técnica apreciarán que los intermedios sintéticos se pueden aislar y/o purificar por medio de diversas técnicas muy conocidas, de acuerdo con lo necesario o deseado, y que, con frecuencia, será posible utilizar diversos intermedios directamente en etapas de síntesis posteriores con poca o ninguna purificación. Además, los expertos apreciarán que en algunas circunstancias, el orden en el que se introducen las unidades estructurales no es crítico.
El esquema 1 representa la preparación del compuesto8.Un experto en la técnica reconocerá que la fenilalanina1adecuadamente disustituida (por ejemplo, X = Br, Cl, I; R4 = H, F), disuelta en un disolvente prótico polar puede esterificarse con un ácido adecuadamente fuerte para obtener la sal esterificada2.La acilación posterior mediante lavado de la sal con base acuosa para obtener la base libre, la disolución en un disolvente aprótico y la adición del cloruro ácido apropiado puede llevarse a cabo para obtener3.La ciclación del éster metílico de fenilalanina 2-substanciado N-acilado3mediante tratamiento con paraformaldehído en un ácido fuerte apropiado y agitación para obtener la tetrahidroisoquinolina4es bien conocida en la técnica. La desmetilación y la descarboxilación pueden lograrse mediante tratamiento con ácido acuoso y agitación a reflujo, para obtener5como la sal amínica correspondiente. Un experto en la técnica reconocerá que la tetrahidroisoquinolina6N-protegida puede formarse disolviendo la sal de amina5en el disolvente aprótico polar adecuado, agregando base y el anhídrido o cloroformiato de alquilo adecuado para obtener el carbamato de tertbutilo6.La reducción posterior al derivado metanólico7puede efectuarse utilizando una serie de agentes reductores, como por ejemplo con un hidruro metálico, una sal de borohidruro o diborano en un disolvente aprótico polar. La tetrahidroisoquinolina8O-protegida puede obtenerse tratando primero la tetrahidroisoquinolina7N-protegida con el ácido fuerte apropiado y concentrándola al vacío. A continuación, la sal de amina puede disolverse en el disolvente aprótico adecuado, tratarse con base y un grupo protector (PG) adecuado (por ejemplo, PG = OSi, OBn, OMOM, etc.) para proporcionar8.Por ejemplo, la protección del alcohol primario con un grupo sililo estable al ácido, TAL como TBDMS o TBDPS, es bien conocida en la técnica.
El esquema 2 ilustra una alternativa para la preparación del intermediario3sustituido requerido (por ejemplo, X = Br, Cl, I; R4 = F). Un experto en la técnica reconocerá que la condensación de Horner-Wadsworth-Emmons entre un benzaldehído13adecuadamente disustituido (R4 = F) y un acetato de amino-2-dimetoxifosforilo14N-protegido puede utilizarse para preparar el ene-carbamato15(por ejemplo, PG = Z). Posterior reducción quiral bajo H2 con un auxiliar quiral apropiado, por ejemplo, con un catalizador de metal de transición Rh(I), como está bien descrito en la técnica, para obtener N-protegido16.El intercambio de grupos N-protectores puede llevarse a cabo bajo una variedad de condiciones reconocibles para un experto en la técnica para obtener3.Las transformaciones posteriores en el compuesto3pueden realizarse como en el esquema 1 para proporcionar el compuesto8(por ejemplo, X = Br, Cl, I; R4 = F).
El esquema 3 representa la síntesis de los compuestos de tipoI'. La formación de la imina a partir de la tetrahidroisoquinolina8puede llevarse a cabo en diversas condiciones oxidativas reconocibles para el experto en la técnica, concretamente la halogenación de la amina secundaria y la posterior eliminación con una base adecuadamente fuerte para proporcionar la dihidroisoquinolina9.Puede utilizarse una reacción de Grignard estereoselectiva tratando la imina9con un haluro de alquilmagnesio adecuado para obtener la trans tetrahidroisoquinolina10.La configuración relativa de la tetrahidroisoquinolina10puede determinarse con el experimento espectroscópico de RMN apropiado, concretamente 1D-NOESY La N-acilación posterior puede lograrse con técnicas de acoplamiento amida bien conocidas en la técnica, por ejemplo, hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfonio en presencia de una base no nucleofílica suave, para preparar el compuesto11.La formación del enlace carbono-carbono utilizando el compuesto11apropiadamente sustituido (por ejemplo, X = Br, Cl, I, etc.) puede efectuarse bajo catálisis de metales de transición, tales como utilizando Pd, Pt, Ni, o Cu, con un éster borónico apropiado o sal trifluoroboranuida, como es bien conocido en la técnica. Alternativamente, puede lograrse el acoplamiento en condiciones de tipo Heck o Sonogashira con un alqueno o alquino adecuadamente sustituido, respectivamente, como es bien conocido en la técnica. Por ejemplo, el acoplamiento cruzado mediado por paladio11con un trifluoroboranuuro de ciclopropilo adecuadamente sustituido puede llevarse a cabo para obtener compuestos de ciclopropilo sustituido del tipo12.Además, puede llevarse a cabo el acoplamiento cruzado mediado por paladio11con un alqueno adecuadamente sustituido para obtener compuestos de tipo12sustituidos con alquilo.El experto reconocerá que la desprotección del alcohol protegido12,en el que PG = OSi, OBn, OMOM, etc., puede ejecutarse en diversas condiciones. Por ejemplo, un grupo protector sililo puede eliminarse con fluoruro de tetrabutilamonio, para obtener los compuestos quirales del tipoI'.
En las siguientes preparaciones y ejemplos ilustrativos, los disolventes se eliminan generalmente a presión reducida (evaporados). En algunos procedimientos, los rendimientos indicados son rendimientos en bruto representativos de productos que se aíslan por evaporación o filtración y se utilizan directamente sin purificación adicional. La estereoquímica relativa en torno al marco de tetrahidroisoquinolina descrito se ha identificado mediante espectroscopia de RMN apropiada, concretamente 1D-NOESY En los casos de configuración alrededor de grupos ciclopropilo sustituidos en sustituciones de cadena lateral, se describe la configuración relativa sin determinación de la estereoquímica absoluta. En los casos de otros centros quirales adicionales en sustituciones de cadenas laterales, no se ha determinado la configuración absoluta. En ambos casos, los pares diastereoméricos se denominan "Isómero 1" o "Isómero 2" cuando se separan mediante técnicas cromatográficas quirales.
Preparación 1
Clorhidrato de 2-bromo-D-fenilalaninato de metilo
Se disuelve 2-bromo-D-fenilalanina (22,4 g, 91,8 mmol) en MeOH (459 ml). Se agrega cloruro de acetilo (65,3 ml, 917,7 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción resultante se agita durante 36 h. La mezcla de reacción se concentra a presión reducida para dar el compuesto base (27,2 g, >99 % de rendimiento). ESMS(m/z)258/260 [M-Cl, 79Br/81Br].
Preparación 2
2-Bromo-N-(metoxicarbonil)-D-fenilalaninato de metilo
El clorhidrato de 2-bromo-D-fenilalaninato de metilo (27,2 g, 92,3 mmol) se disuelve en una mezcla bifásica de DCM (923 ml) y agua (185 ml). Se agregan NaHCO3 (31 g, 369,4 mmol) y cloroformiato de metilo (7,9 ml, 101,6 mmol) a RT y la mezcla resultante se agita durante 2,5 h. La mezcla se diluye con agua y se extrae con DCM. Los extractos orgánicos se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 10-75 % en hexanos para dar el compuesto base (29,1 g, rendimiento >99 %) después de la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS(m/z):316/318 [M+H, 79Br/81Br].
Preparación 3
(3R)-5-bromo-3,4-dihidro-1H-isoquinolina-2,3-dicarboxilato de dimetilo
Una mezcla de 2-bromo-N-(metoxicarbonil)-D-fenilalaninato de metilo (29,1 g, 92,1 mmol) y paraformaldehído (9,13 g, 101,3 mmol) se agita en ácido acético glacial (115 ml, 2 mol) que contiene H2SO4 concentrado (38,4 ml, 719,9 mmol) a RT, durante 7 horas. La mezcla de reacción se reparte entre agua y EtOAc, se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 5-40 % en hexanos, para dar el compuesto base (27,6 g, rendimiento del 91 %) después de la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 328/330 [M+H, 79Br/81Br].
Preparación 4
Clorhidrato de (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxilato de metilo
HCI
El (3R)-5-bromo-3,4-dihidro-1H-isoquinolina-2,3-dicarboxilato de dimetilo (27,6 g, 84 mmol) se disuelve en HCl 5 N (330,6 ml, 1,7 mol) y la mezcla resultante se calienta a reflujo durante tres días. La mezcla se concentra a presión reducida para dar un sólido de color blanco. El sólido se recoge por filtración, se lava con éter dietílico y se seca al vacío a 40 °C, durante la noche para dar clorhidrato de ácido (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico (1:1) (20,8 g, 71,1 mmol). Se agrega cloruro de acetilo (50,6 ml, 711,0 mmol) a una mezcla a 0 °C de clorhidrato de ácido (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico (1:1) (20,8 g, 71,1 mmol) en MeOH (474 ml). La mezcla se calienta hasta RT y se agita durante 36 h. La mezcla se concentra a presión reducida y se seca para dar el compuesto base (21,9 g, 85 % de rendimiento). ESMS (m/z): 270/272 [M+H, 79Br/81Br].
Preparación 5
2-tert-Butil-3-metil-(3R)-5-bromo-3,4-dihidro-1H-/soqu/no//na-2,3-dicarboxilato
El clorhidrato de (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxilato de metilo (21,0 g, 68,5 mmol) se disuelve en 1,4-dioxano (685 ml). Se agregan NaHCO3 acuoso saturado (685 ml, 17,5 mol) y di-tertbutildicarbonato (29,9 g, 137,0 mmol) a RT y la mezcla bifásica se agita a RT durante 90 min. La mezcla se extrae con EtOAc y los extractos orgánicos se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 5-50 % de EtOAc en hexanos, para dar el compuesto base (19,5 g, rendimiento del 77 %) después de la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. MS (m/z): 270/272 [M-tBoc+H, 79Br/81Br].
Preparación 6
(3R)-5-bromo-3-(hidroximetil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolina-2-carboxilato de tert-butilo
Se agrega una solución 2 M de borohidruro de litio (99,4 ml, 198,8 mmol) en THF y MeOH (10,1 ml, 248.5 mmol) a una solución de 2-tert-butil-3-metil-(3R)-5-bromo-3,4-dihidro-1H-isoquinolina-2,3-dicarboxilato (18,4 g, 49,7 mmol) en THF (497 ml) y la mezcla resultante se agita a RT durante 40 min. La reacción se inactiva con agua y se extrae con EtOAc. Los extractos orgánicos se separan, se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 5-80 % en hexanos. Se evapora el disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas y el residuo resultante se seca a alto vacío durante la noche para dar el compuesto base como sólido de color blanco (19,1 g, >99 % de rendimiento). ESMS (m/z): 286/288 [MtBu+H, 79Br/81Br].
Preparación 7
[(3R)-5-Bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il]metoxi-tert-butil-dimetil-silano
Se agrega ácido trifluoroacético (75,5 ml, 998,3 mmol) a una solución de (3R)-5-bromo-3-(hidroximetil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxilato de tert-butilo (15,5 g, 45,3 mmol) en DCM (226 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agita a RT durante 30 min y se concentra a presión reducida. El residuo resultante se seca al vacío para dar el ácido [(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il]metanol 2,2,2-trifluoroacético como sólido húmedo. se disuelve el ácido [(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il]metanol 2,2,2-trifluoroacético en DCM (753 ml). Se agregan 1H-imidazol (51,3 g, 753 mmol), N,N-dimetil-4-piridinamina (460 mg, 3,77 mmol) y tbutildimetilclorosilano (13,6 g, 90,4 mmol) y la mezcla resultante se agita a RT durante la noche. Se agrega una solución saturada de NH4Cl y se extrae la mezcla con DCM. La capa de DCM se separa, se seca sobre Na2SO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El producto en bruto se combina a partir de una reacción sustancialmente igual con (3R)-5-bromo-3-(hidroximetil)-3,4-dihidro-1H-isoquinolina-2-carboxilato de tert-butilo (6,6 g, 19,4 mmol). El producto en bruto combinado se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente del 5-40 % de EtOAc en hexanos, para dar el compuesto base (14,3 g, 89 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 356/358 [M+H, 79Br/81Br].
Preparación 8
[(3R)-5-Bromo-3,4-dihidroisoquinolin-3-il]metoxi-tert-butil-dimetil-silano
Se disuelve[(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il]metoxi-tert-butil-dimetil-silano (4,2 g, 11,8 mmol) en éter dietílico (118 ml) y se agrega N-clorosuccinimida (2,36 g, 17,7 mmol). La mezcla resultante se agita a RT durante 30 min y se concentra a presión reducida. El residuo resultante en se disuelve en una solución al 5 % de KOH en MeOH (42,0 ml, 30,3 mmol) y se agita durante 30 min a RT. La mezcla se vierte en agua y se extrae con DCM. Los extractos de DCM se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre sílice, eluyendo con un gradiente de 5-100 % EtOAc en hexanos, para obtener el compuesto base (3,40 g, 82 % de rendimiento). ESMS (m/z): 354/356 [M+H, 79Br/81Br].
Alternativamente, se agrega N-clorosuccinimida (106,7 g, 790 mmol) a una solución de [(3R)-5-bromo-3,4-dihidroisoquinolin-3-il]metoxi-tert-butil-dimetil-silano (220 g, 520 mmol) en THF (3,85 L) a rT en un recipiente apropiado con agitación durante 30 min. La mezcla se concentra a presión reducida y el residuo se disuelve en KOH al 5 % en peso en metanol (2,2 L, 1,7 moles) con agitación a RT durante 30 min. La mezcla se agrega a agua (3 L) y se extrae tres veces con DCM (3 * 1 L). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre MgSO4 anhidro y se filtran, y el filtrado se concentra a presión reducida para dar el compuesto base (210 g, >99 % de rendimiento). ESMS (m/z): 354/356 [M+H, 79Br/81Br].
Preparación 9
[(1S,3R)-5-Bromo-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il]metoxi-tert-butil-dimetilsilano
[(3R)-5-bromo-3,4-dihidroisoquinolin-3-il]metoxi-tert-butil-dimetil-silano (3,4 g, 9,6 mmol) se disuelve en éter dietílico (160 ml) y se enfría a -78 °C en un baño de hielo seco - acetona. Se agrega gota a gota una solución 3M de cloruro de metilmagnesio en THF (26,9 ml, 80,6 mmol). La mezcla se calienta lentamente hasta RT y se agita durante la noche. La mezcla de reacción se inactiva lentamente mediante la adición de una solución saturada de NH4Cl. La mezcla resultante se extrae con DCM, se seca sobre NaSO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El producto en bruto se combina con material de una reacción sustancialmente igual con 1,7 mmol de [(3R)-5-bromo-3,4-dihidroisoquinolin-3-il]metoxi-tert-butil-dimetil-silano. Los residuos combinados se purifican mediante cromatografía instantánea sobre sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 5-65 % en hexanos, para obtener el compuesto base (3,78 g, >99 % de rendimiento) después de la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 370/372 [M+H, 79Br/81Br].
La configuración relativa del compuesto [(1S,3R)-5-bromo-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il]metoxi-tertbutil-dimetil-silano se determina mediante espectroscopia de RMN utilizando 1D-NOESY. La excitación selectiva del grupo metilo a 1,30 ppm da lugar a una NOE para Ha a 3,11 ppm. Este aumento de la NOE sólo es coherente con una configuración en la que el metilo y Ha están en el mismo lado del anillo (isómerotrans),ya que en el isómerocislos protones del metilo están demasiado lejos de Ha para mostrar una NOE. Como se sabe que la química absoluta de la posición 3 es R, se deduce que la química absoluta de la posición 1 es S.
Preparación 10
1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetíl]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona
El ácido 2,6-diclorofenilacético (3,7 g, 18 mmol) se combina con [(1S,3R)-5-bromo-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il]metoxi-tert-butil-dimetil-silano (5 g, 13,5 mmol), HATU (7,7 g, 20 mmol) y DIPEA (7,1 ml, 41 mmol) en DCM (70 ml). La mezcla se agita bajo un manto de nitrógeno a RT durante 2 h. La solución de reacción se concentra a presión reducida y el residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-25 % de EtOAc en hexanos para dar el compuesto base (6,2 g, 81 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 558 (M+1).
Preparación 11
trans-Etil-2-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-5-il]ciclopropanocarboxilato
1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetíl]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-didorofenil) etanona (500 mg, 0,9 mmol) se combina con [trans-2-etoxicarbonilciclopropil]-trifluoro-boranuuro de potasio (300 mg, 1,3 mmol; véase el documento PCT/FR2013/053057), KH2PO4 (370 mg, 2,7 mmol), y el complejo 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-didoruro de paladio(N)didorometano (115 mg, 0,1 mmol,) en 1,4-dioxano (8 ml, 93,2 mmol) y agua (2 ml) en un vial de microondas. El vial se tapa, se purga con nitrógeno y se irradia a 120 °C en un microondas durante 2 h. La solución de reacción se concentra a presión reducida y el residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-25 % de EtOAc en hexanos, para dar el compuesto base como una mezcla de isómeros trans (245 mg, 46 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 590 (M+1).
Preparación 12
1-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-[trans-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona
El 2-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-5-il]ciclopropanocarboxilato de trans-etilo (240 mg, 0,4 mmol) se agita en THF (4 ml) y se enfría a 0 °C. Se agrega una solución 3 M de cloruro de metilmagnesio en THF (1,75 ml, 5,25 mmol) gota a gota mediante una jeringa a 0 °C, durante 5 min. La mezcla resultante se agita bajo nitrógeno durante 1 h, se inactiva con NH4Cl acuoso saturado y se extrae con EtOAc. La capa orgánica se separa, se seca sobre Na2SO4, se filtra y el filtrado resultante se concentra a presión reducida para obtener el compuesto base como una mezcla de isómeros trans alrededor del sustituyente ciclopropilo, adecuada para su uso sin purificación adicional. ESMS (m/z): 576 (M+1).
Preparación 13
2-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-5-il]ciclopropanocarboxilato de cis-etilo
Utilizando esencialmente el procedimiento descrito en la preparación 2, se combina 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[tertbutil(dimetil)silil]oximetíl]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-didorofenil)etanona (500 mg, 0,9 mmol) con [cis-2-etoxicarbonilciclopropil]-trifluoro-boranuuro de potasio (WZ5-E16784-076-B, 300 mg, 1,3 mmol; véase el documento PCT/FR2013/053057) para dar el compuesto base como una mezcla de isómeros cis (280 mg, 53 % de rendimiento). ESMS (m/z): 590 (<m>+1).
Preparación 14
1-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetfl]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metilpropil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona Isómero 1 y 1-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metilpropil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona Isómero 2
Utilizando esencialmente el procedimiento descrito en la preparación 3, se preparó una mezcla de 2-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-5-il]ciclopropano carboxilato de cis-etilo (280 mg, 0,5 mmol) y una solución 3M de bromuro de metilmagnesio en T<h>F (2 ml, 6 mmol), con purificación posterior por cromatografía instantánea sobre gel de sílice, usando un gradiente de 0-25 % de EtOAc en hexanos, da los compuestos base como isómeros cis separados, 1-[(1S,3R)-3-[[tertbutil(dimetil)silil]oximetil]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona Isómero 1 (110mg, 38 % de rendimiento) y 1-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(dimetil)silil]oximetíl]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1-metil-3.,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona Isómero 2 (65 mg, 23 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS(m/z)para cada uno: 576 (M+1).
Preparación 15
4-[(1S,3R)-3-[[tert-Butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2-cloro-6-fluorofenil)acetil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-5-il]butan-2-ona
1- [(1 S,3R)-5-Bromo-3-[[tert-butil(dimetil)sNN]oximetil]-1-metN-3,4-dihidro-1H-isoquinoNn-2-N]-2-(2-doro-6-fluorofenil)etanona (2 g, 3.7 mmol), tris(dibencilideneacetona)dipaladio(0) (169 mg, 0,2 mmol) y di-tert-butil-O-fenilindol-2- il)fosfano (187 mg, 0,55 mmol) se suspenden en DMF (12,3 ml). Se agregan tyN-diclohexilmetilamina (0,9 ml, 4 mmol) y but-3-en-2-ol (0,45 ml, 5,2 mmol), y se desgasifica la mezcla burbujeando con nitrógeno durante 10 min. Se sella el recipiente de reacción y se calienta a 100 °C, durante 1,5 h con agitación. La mezcla de reacción se enfría a RT y se diluye con EtOAc. La capa orgánica se separa, se lava con NaCl saturado , se seca sobre Na2SO4, se filtra y se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, utilizando un gradiente de 5-30 % de EtOAc en hexanos, para dar el compuesto base como una espuma de color blanco (1,5 g, 75 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 532 (M+1).
Preparación 16
1-((1S,3R)-3-(((tert-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-5-((R)-4,4-d¡fluoro-3-met¡l-3-((tr¡met¡ls¡l¡l)ox¡)but¡l)-1-met¡l-3,4-d¡h¡dro¡soqu¡nol¡n-2(1H)-¡l)-2-(2-doro-6-fluorofen¡l)etan-1 -ona y 1-((1S,3R)-3-(((tertbut¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-5-((S)-4,4-d¡fluoro-3-met¡l-3-((tr¡met¡ls¡l¡l)ox¡)but¡l)-1-met¡l-3,4-d¡h¡dro¡soqu¡nol¡n-2(1H)-¡l)-2-(2-doro-6-fluorofen¡l)etan-1 -ona
4-[(1S,3R)-3-[[tert-but¡l(d¡met¡l)s¡l¡l]ox¡met¡l]-2-[2-(2-doro-6-fluorofen¡l)acet¡l]-1-met¡l-3,4-d¡h¡dro-1H-¡soqu¡nol¡n-5-il]butan-2-ona (580 mg, 1,1 mmol) y 18-corona-6 (29 mg, 0,1 mmol) se disuelven en 1,2-dimetoxietano (5,5 ml). Se agrega (difluorometiOtrimetilsilano (0,30 ml, 2 mmol), seguido de CsF (17 mg, 0,1 mmol). La mezcla se calentó a 60 °C y se agitó durante la noche. Se agregan (difluorometiOtrimetilsilano (0,30 ml, 2 mmol), 18-corona-6 (29 mg, 0,1 mmol) y CsF (17 mg, 0,1 mmol) adicionales y la mezcla de reacción se agita a 60 °C, durante 4 h. La mezcla se enfría a RT, se diluye con EtOAc y los extractos orgánicos separados se lavan con NaCl acuoso saturado. La capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre sílice, utilizando un gradiente de 0-10 % EtOAc en hexanos, para dar una mezcla de los compuestos base como espuma de color blanco (493 mg, 68 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 656 (M+1).
Preparación 17
^^-(((benciloxOcarboniOamino^-^-bromo^-fluorofeniOacrilato de metilo
Se disuelve 2-(benciloxicarbonilamino)-2-dimetoxifosforil-acetato de metilo (25,5 g, 76,9 mmol) en DCM (250 ml) y se enfría la solución a 0 °C. Se agrega 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (12 ml, 79,9 mmol) y se agita la mezcla 30 min a 0 °C. Se agrega lentamente durante 20 min a 0 °C una solución de 2-bromo-3-fluoro-benzaldehído (13,0 g, 64 mmol) en DCM (250 ml). La mezcla se agita a 0 °C, durante 2 h. La mezcla se transfiere a un embudo de decantación y se lava secuencialmente con solución acuosa saturada de NH4Cl (200 ml) y solución acuosa saturada de NaCl (200 ml). La capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida para proporcionar un sólido de color blanco. El sólido se recristaliza de EtOAc caliente y se recoge por filtración, para proporcionar el compuesto base como sólido de color blanco (25 g, 80 % de rendimiento). ESMS (m/z): 407 (M+1).
Preparación 18
(R)-2-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)propanoato de metilo BMD-E17046-003
Dentro de una caja de guantes, se agrega (Z)-2-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)acrilato de metilo (26 g, 63,8 mmol) a un recipiente autoclave que contiene MeOH (300 ml). Se agrega [((R)-tertbutilmetilfosfino)(di-tert-butilfosfino)amina](1,5-ciclooctadieno)tetrafluoroborato de rodio(I) (430 mg, 0,8 mmol) y se sella el recipiente del autoclave y se saca de la caja de guantes. La mezcla se lava con gas H2 durante 15 segundos y se presuriza a 100 psi de H2. La mezcla resultante se agita a RT durante 15 h. Se ventila el recipiente del autoclave y la mezcla se concentra a presión reducida para obtener el compuesto base como un sólido de color blanco, adecuado para su uso sin purificación adicional (26,3 g, 98 % de rendimiento). ESMS (m/z): 410 (M+1). Para obtener una muestra analíticamente pura, una porción del producto en bruto (66 mg) se purifica por cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con 15 % de EtOAc en hexanos, para dar el producto como un sólido de color blanco después de la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. Análisis HPLC quiral (columna CHIRALCEL® OJ-H, 0,2 % de isopropanol/MeOH, 1 ml/min): enantiómero mayor tR: 2,981 min, enantiómero menor tR: 3,557 min. Medido >99 %ee.
Preparación 19
(R)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)-2-((metoxicarbonil)amino)propanoato de metilo
Se disuelve (R)-2-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)propanoato de metilo (21,25 g, 51,8 mmol) en DCM (110 ml) y se agrega una solución al 33 % de HBr en ácido acético (28,1 ml, 155 mmol). La mezcla resultante se calentó a RT durante 1h. Se agregan agua (100 ml) y DCM (100 ml) y la mezcla resultante se agita enérgicamente durante 15 min. Se separa la capa orgánica y se desecha. Se agregan DCM (200 ml) y Na2CO3 (35,1 g, 331,5 mmol) a la capa acuosa. Se agrega cloroformiato de metilo (5,2 ml) a la mezcla y la mezcla resultante se agita a RT durante la noche. La mezcla se extrae con DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCl acuoso saturado, se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida para dar la base como sólido de color blanco (13,6 g, 78 % de rendimiento). ESMS (m/z): 333 (M+1).
Preparación 20
Clorhidrato del ácido (R)-5-bromo-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico
El (R)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)-2-((metoxicarbonil)amino)propanoato de metilo (17 g, 50,9 mmol) y el paraformaldehído (6,9 g, 76,4 mmol) se suspenden en ácido acético (128 ml). La solución se enfría a 0 °C y se agrega H2SO4 concentrado (43 ml). La mezcla resultante se calienta a 35 °C y se agita durante la noche. La mezcla de reacción se enfría a RT y se vierte en agua (200 ml). La suspensión resultante se extrae con EtOAc y los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCl acuoso saturado, se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se disuelve en HCl concentrado (231 ml) y la mezcla resultante se calienta a 120 °C en un matraz de fondo redondo equipado con un refrigerante de reflujo durante la noche. La mezcla de reacción se enfría a RT y se concentra a 50 °C a presión reducida. El residuo resultante se seca a 40 °C al vacío durante 18 h para dar el compuesto base como sólido incoloro (15 g, 94 % de rendimiento). ESMS (m/z): 273 (M+1).
Preparación 21
(R)-(5-bromo-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il)metanol
El clorhidrato del ácido (R)-5-bromo-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico (9,95 g, 32,0 mmol) se suspende en THF (80 ml) y la mezcla se enfría a 0 °C. Se agrega lentamente una solución 1M del complejo boranotetrahidrofurano (96 ml, 96 mmol). La mezcla se calentó a 60 °C y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se enfría a 0 °C y se agregan MeOH (20 ml) y solución acuosa saturada de NH4Cl (40 ml) y la mezcla se agita a RT durante 10 min. Se agrega HCl 5N acuoso (60 ml) y la mezcla resultante se calienta a 45 °C, durante 4 h. La mezcla se enfría a 0 °C y se agrega NH4OH acuoso concentrado al 21 % en peso. La mezcla se calienta a RT. La mezcla resultante se extrae con CHCl3:isopropanol 3:1. Los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCl acuoso saturado, se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida para proporcionar el compuesto base como un sólido de color beige (9,5 g, 86 % de rendimiento). ESMS (m/z): 259 (M+1).
Preparación 22
(R)-5-bromo-3-(((tert-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina
Se disuelve (R)-(5-Bromo-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-il)metanol (12,6 g, 48,3 mmol) en una mezcla de DCM (185 ml) y DMF (146 ml). Se agregan imidazol (16,4 g, 241,5 mmol) y 4,4-dimetilaminopiridina (118 mg, 1 mmol), seguidos de tertbutilclorodifenilsilano (13,8 ml, 53,1 mmol). La mezcla resultante se agita a RT durante 1 h. Se agrega MeOH (100 ml) y la mezcla se agita durante 1 h más. Se agrega solución acuosa saturada de NH4Cl (200 ml) y la mezcla se extrae con DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCl acuoso saturado, se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 2-50 % en hexanos, para dar el compuesto base en forma de aceite (10,5 g, rendimiento del 45 %) después de la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 498 M+1).
Preparación 23
(R)-5-bromo-3-(((tert-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-3,4-dihidroisoquinolina
(R)-5-Bromo-3-(((tert-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-1,2,3,4-tetra-hidisoquinolina (10,9 g, 21,9 mmol) se disuelve en THF (200 ml) y se agrega N-clorosuccinimida (4,4 g, 32,9 mmol). La mezcla resultante se agita a RT durante 40 min y se concentra a presión reducida. El residuo resultante se disuelve en KOH 0,75M en MeOH (100 ml) y se agita a RT durante 30 min. La mezcla de reacción se diluye con agua (50 ml) y se extrae con DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCl acuoso saturado, se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 5-50 % en hexanos, para obtener el compuesto base como un aceite incoloro (9,63 g, 88 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas agrupadas. ESMS (m/z): 496 (M+1).
Preparación 24
(1S,3R)-5-Bromo-3-(((fe/f-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina
La (R)-5-bromo-3-(((tert-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-3,4-dihidroisoquinolina (7,5 g, 15 mmol) se disuelve en fe/f-butilmetil éter (190 ml) bajo nitrógeno y la solución se enfría a -15 °C. Se agrega gota a gota una solución 3M de cloruro de metilmagnesio en THF (20 ml, 60 mmol) y la mezcla de reacción se calienta a RT y se agita 2 h más. La mezcla se enfría a 0 °C y se agregan secuencialmente MeOH (4 ml) y solución acuosa saturada de NH4Cl (4 ml). La mezcla resultante se extrae con DCM. Los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCl acuoso saturado, se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de fe/f-butilmetiléter al 2-5 % en DCM, para dar el compuesto base en forma de un aceite de color amarillo (1,7 g, rendimiento del 23 %) después de la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 512 (M+1).
Preparación 25
1 -[(1S,3R)-5-Bromo-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona
(1S,3R)-5-Bromo-3-(((fe/f-but¡ld¡fen¡ls¡l¡l)oxi)met¡l)-6-fluoro-1-met¡l-1,2,3,4-tetrah¡dro¡soqu¡nol¡na (5,2 g, 10,1 mmol) se d¡suelve en DMF (101 ml). Se agregan secuenc¡almente ác¡do 2-(2-cloro-6-fluoro-fen¡l)acét¡co (2,5 g, 13,2 mmol), 1-[b¡s(d¡met¡lam¡no)metileno]-1H-/,2,3-tr¡azolo[4,5-b]p¡r¡d¡n¡o 3-oxid hexafluorofosfato (5 g, 13,2 mmol) y DIPEA (8,8 ml, 50,6 mmol), y la mezcla resultante se agita a RT durante la noche. Se agrega agua (200 ml) y la mezcla se extrae con EtoAc. Los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCl acuoso saturado, se secan sobre Na2SO4, se filtran y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-25 % en hexanos, para obtener el compuesto base como una espuma de color blanco (6,3 g, rendimiento del 91 %) después de la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 682 (M+1).
Preparación 26
1-[(1S,3R)-3-[[tert-But¡l(d¡fen¡l)s¡l¡l]ox¡metil]-6-fluoro-5-(3-h¡drox¡-3-met¡l-but-1-¡n¡l)-1-met¡l-3,4-d¡h¡dro-1H-¡soqu¡nol¡n-2-¡l]-2-(2-cloro-6-fluorofenil)etanona
1 -[(1S,3R)-5-Bromo-3-[[tert-butil(d¡fen¡l)s¡l¡l]oximet¡l]-6-fluoro-1 -metil-3,4-d¡h¡dro-1H-¡soqu¡nol¡n-2-¡l]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona (5.8 g, 8.5 mmol), tri-tert-but¡lfosf¡na(cloro)(crot¡lo)paladio(N) (675 mg, 1,7 mmol) y 2-tiofenocarboxilato cuproso (258 mg, 1,35 mmol) se agregan a un matraz de fondo redondo de 500 ml. Se evacua el matraz y se rellena con nitrógeno. Se agregan DMF (60 ml), DIPEA (6 ml, 42,5 mmol) y 2-metilbut-3-in-2-ol (4,1 ml, 42,2 mmol). La mezcla de reacción se calienta a 40 °C y se agita durante la noche. La mezcla se enfrió a RT, se diluyó con EtOAc y las fases se separaron. La capa orgánica se lava secuencialmente con agua y NaCl acuoso saturado, se seca sobre Na2SO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica por cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 20-40 % en hexanos para dar el compuesto base en forma de una espuma de color blanco (5,4 g, 93 %) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 686 (M+1).
Preparación 27
1-[(1S,3R)-3-[[tert-but¡l(d¡fen¡l)s¡l¡l]ox¡met¡l]-6-fluoro-5-(3-h¡droxi-3-met¡lbut¡l)-1-met¡l-3,4-d¡h¡dro-1H-¡soqu¡nol¡n-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona
Se purga con nitrógeno un agitador Parr y se agrega platino sobre carbono sulfatado al 5% en peso (2,5 g). El recipiente se purga de nuevo con nitrógeno. Se agrega EtOAc(50 ml). Se agrega una solución de 1-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-(3-hidroxi-3-metil-but-1-inil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona (5,4 g, 7,9 mmol) disuelta en EtOAc (50 ml). El recipiente de reacción se purga con gas H2 y se presuriza a 60 psi de H2. La mezcla de reacción se agita durante 3 h a R<t>. Se agrega platino sobre carbono sulfatado adicional al 5 % en peso (1,21 g) suspendido en EtOAc (30 ml) y se represuriza el recipiente a 60 psi de H2. Se agita el recipiente de reacción durante 8 h más. Se despresuriza el recipiente y se purga con nitrógeno. La suspensión resultante se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-100 % de EtOAc en hexanos (gradiente 0-100 %), para dar el compuesto base como una espuma de color blanco (5,33 g, 7,72 mmol) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. MS (m/z): 690,4 (M+1).
Preparación 28
2-((1S,3R)-3-(((tert-butildifenilsilil)oxi)metil)-2-(2-(2-cloro-6-fluorofenil)acetil)-6-fluoro-1 -metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-5-il)ciclopropano-1-carboxilato de trans-etilo
1 -[(1S,3R)-5-Bromo-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetíl]-6-fluoro-1 -metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona (665 mg, 1 mmol), [(trans-2-etoxicarbonilciclopropil]-trifluoroborato de racpotasio (CAS# 1612792-88-7 véase el documento PCT/<f>R2013/053057; 12 de diciembre de 2013) (257 mg, 1,2 mmol), yoduro de di(1-adamantanil)-n-butilfosfonio (50 mg, 0,1 mmol), [(di(1-adamantanil)-butilfosfina)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]metanosulfonato de paladio(II) (75 mg, 0.1 mmol) y Cs2Co 3 (631 mg, 1,9 mmol) se suspenden en una mezcla de tolueno (10 ml) y agua (1 ml). La mezcla se desgasifica con nitrógeno durante 5 minutos, se sella el vial y se calienta a 100 °C con agitación durante la noche. La mezcla de reacción se enfría a RT y se diluye con EtOAc. La mezcla resultante se lava secuencialmente con agua, NaHCO3 acuoso saturado, agua y NaCl acuoso saturado, y se separan las capas. La fase orgánica se seca sobre MgSO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-100 % de etil fe/fbutiléter en hexanos, para obtener una mezcla de los compuestos base como sólido de color amarillo (448 mg, 61 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 716 (M+1).
Preparación 29
1-[(1R,3R)-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetíl]-6-fluoro-5-[(trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona
Una mezcla de 2-((1S,3R)-3-(((fe/f-but¡ld¡fen¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-2-(2-(2-cloro-6-fluorofen¡l)acet¡l)-6-fluoro-1-met¡l-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-5-il)cidopropano-1-carboxilato de trans-et¡lo Isómero 1 y 2-((1S,3R)-3-(((fe/fbut¡ld¡fen¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-2-(2-(2-cloro-6-fluorofen¡l)acet¡l)-6-fluoro-1-met¡l-1,2,3,4-tetrah¡dro¡soqu¡nol¡n-5-¡l) ddopropano-1-carboxilato de trans-et¡lo Isómero 2 (440 mg, 0,6 mmol) se d¡suelve en THF (4 ml) y se enfría a 0 °C. Se agrega lentamente una soluc¡ón 1M de bromuro de met¡lmagnes¡o en THF (1,4 ml, 1,4 mmol) durante 10 m¡n, y la mezcla de reacc¡ón resultante se cal¡enta a RT y se ag¡ta durante la noche. La mezcla de reacc¡ón se enfría a 0 °C y se agrega una soluc¡ón ad¡c¡onal 1M de bromuro de met¡lmagnes¡o en THF (1,4 ml, 1,4 mmol). La mezcla de reacc¡ón se cal¡enta a RT y se ag¡ta 8 h. La mezcla se ¡nact¡va con MeOH (130 ^l) y se ag¡ta a RT durante la noche. La mezcla de reacc¡ón se d¡luye con EtOAc y la soluc¡ón resultante se lava secuenc¡almente con NaHCO3 acuoso saturado, agua y NaCl acuoso saturado. Se separan las capas y la fase orgán¡ca se seca sobre MgSO4 y se f¡ltra. El f¡ltrado se concentra a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡ca med¡ante cromatografía ¡nstantánea sobre gel de síl¡ce, eluyendo con un grad¡ente de 0-100 % de met¡l tert-but¡l éter en hexanos, para obtener una mezcla de los compuestos base como sól¡do de color amarillo (245 mg, 42 % de rend¡m¡ento) tras la evaporac¡ón del d¡solvente de las fracc¡ones cromatográf¡cas deseadas. ESMS (m/z): 702 (M+1).
Preparac¡ón 30
1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[tert-but¡l(d¡fen¡l)s¡l¡l]ox¡met¡l]-6-fluoro-1-met¡l-3,4-d¡h¡dro-1H-¡soqu¡nol¡n-2-¡l]-2-(2,6-d¡clorofen¡l)etanona
(1S,3R)-5-bromo-3-(((fe/f-but¡ld¡fen¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-6-fluoro-1-met¡l-1,2,3,4-tetrah¡dro¡soqu¡nol¡na (500 mg, 1 mmol), ác¡do 2-(2,6-d¡clorofen¡l)acét¡co (260 mg, 1,3 mmol) y 1-[b¡s(d¡met¡lam¡no)met¡leno]-1H-7,2,3-tr¡azolo[4,5-b]p¡r¡d¡n¡o 3-ox¡d hexafluorofosfato (482 mg, 1,3 mmol) se suspende en DMF (10 ml). Se agrega DIPEA (0,85 ml, 4,9 ml) y la mezcla se ag¡ta a RT durante 72 h. La mezcla de reacc¡ón se d¡luye con EtOAc y se lava secuenc¡almente con agua y NaCl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡ca med¡ante cromatografía ¡nstantánea sobre gel de síl¡ce, eluyendo con un grad¡ente de EtOAc al 5-15 % en hexanos para dar el compuesto base en forma de una espuma de color blanco (680 mg, 0,97 mmol) tras la evaporac¡ón del d¡solvente de las fracc¡ones cromatográf¡cas deseadas. ESMS (m/z): 698 (M+1).
Preparac¡ón 31
2-[(1S,3R)-3-[[tert-but¡l(d¡fen¡l)s¡l¡l]ox¡met¡l]-2-[2-(2,6-d¡clorofen¡l)acet¡l]-6-fluoro-1-met¡l-3,4-d¡h¡dro-1H-¡soqu¡nol¡n-5-¡l]c¡clopropanocarbox¡lato de trans et¡lo
1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona (604 mg, 0,9 mmol), [(trans-2-etoxicarbonilciclopropil]-trifluoroborato de racpotasio (CAS# 1612792-88-7; véase el documento PCT/F<r>2013/053057; 12 de diciembre de 2013) (228 mg, 1 mmol), yoduro de di(1-adamantanil)-n-butilfosfonio (44 mg, 0,1 mmol), [(di(1-adamantanil)-butilfosfina)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]metanosulfonato de paladio(II) (66 mg, 0.1 mmol) y Cs2C ü3 (565 mg, 1,7 mmol) se suspenden en una mezcla de tolueno (10 ml) y agua (1 ml). La mezcla resultante se rocía con nitrógeno durante 5 min, se sella la reacción y se calienta a 100 °C con agitación durante la noche. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, se diluye con EtOAc y se lava secuencialmente con agua, NaHCO3 acuoso saturado, agua y NaCl acuoso saturado. Se separan las capas, y la fase orgánica se seca sobre MgSO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-100 % de metil fe/f-butiléter en hexanos, para obtener los compuestos base como mezcla de diastereómeros trans en forma de sólido de color amarillo (417 mg, 64 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 732 (M+1).
Preparación 32
1-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona
Una mezcla de 2-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-5-il]ciclopropanocarboxilato de trans etilo Isómero 1 y 2-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-5-il]ciclopropanocarboxilato de trans etilo Isómero 2 (405 mg, 0,6 mmol) se disuelve en THF (3 ml) y la mezcla se enfría a 0 °C. Se agrega lentamente una solución 1M de bromuro de metilmagnesio en THF (2,8 ml, 2,8 mmol) durante 10 min y la mezcla de reacción se calienta a RT y se agita durante la noche. La mezcla de reacción se enfría a 0 °C y se inactiva con MeüH (220 ^l). La mezcla de reacción se diluye con EtOAc y se lava secuencialmente con agua y NaCl acuoso saturado. Se separan las capas, y la fase orgánica se seca sobre MgSO4, se filtra, y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-100 % de metil fe/f-butiléter en hexanos, para obtener los compuestos base como mezcla de diastereómeros trans en forma de sólido de color amarillo (336 mg, 55 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. Es Ms (m/z): 718 (M+1).
Ejemplos 1 y 2
2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 y 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2
Se agrega una solución 1M de formiato de tetrabutilamonio en THF (0.8 ml) a una solución de 1-[(1S,3R)-3-[[tertbutil(dimetil)silil]oximetíl]-5-[(trans-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1-metM-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona (170 mg, 0,3 mmol) en THF (2,5 ml) y la mezcla resultante se agita durante 30 min. La mezcla de reacción se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-65 % de EtOAc en hexanos con purificación adicional mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-50 % de EtOAc en DCM, para dar el compuesto base, 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2 (20 mg, 14 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. Las fracciones mixtas de la cromatografía instantánea se purifican adicionalmente mediante cromatografía en fase inversa sobre gel de sílice 18C, utilizando un gradiente de 5-95 % de agua que contiene bicarbonato de amonio en acetonitrilo) para dar el compuesto base, 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 (26 mg, rendimiento del 18 %) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS(m/z)para cada uno: 462 (M+1). 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) Isómero 1: 80,66-1,01 (m, 4H), 1,08-1,27 (m, 6H), 1,40-1,89 (m, 1H), 2,00-2,08 (m, 1H), 2,66-3,04 (m, 2H), 3,20 3,32 (m, 2H), 3,63-3,75 (m, 1H), 4,09-4,31(m, 3H), 4,38-4,50 (m, 1H), 4,98-5,25 (m, 2H), 6,88-7,16 (m, 3H), 7,33 (t, 1H), 7,48 (d, 2H). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Isómero 2: 80,66-1,01 (m, 4H), 1,06-1,31 (m, 5H), 1,40-1,89 (m, 2H), 1,99-2,05 (m, 1H), 2,67-3,00 (m, 2H), 3,24-3,32 (m, 2H), 3,66-3,77 (m, 1H), 4,09-4,01(m, 3H), 4,40-4,49 (m, 1H), 4,98-5,25 (m, 2H), 6,92-7,15 (m, 3H), 7,34 (t, 1H), 7,48 (d, 2H).
Ejemplos 3 y 4
2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 y 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2
Usando esencialmente el procedimiento descrito en los ejemplos 1 y 2, usando 1-[(1S,3R)-3-[[tertbutil(dimetil)silil]oximetíl]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etenona Isómero 1 (100 mg, 173 mmol) da el compuesto base 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 (61 mg, 76 % de rendimiento). ESMS(m/z):462 (M+1). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Isómero 1: 80,55 (s, 1H), 0,65 (s, 2H), 0,94-1,00 (m, 2H), 1,07-1,22 (m, 7H), 1,40-1,49 (m, 2H), 1,98-2,07 (m, 1H), 2,60-3,15 (m, 2H), 3,20 3,29 (m, 1H), 3,53-3,65 (m, 1H), 4,09-4,34 (m, 2H), 4,37-4,48 (m, 1H), 4,98-5,34 (m, 2H), 7,00-7,22 (m, 3H), 7,30 7,37 (m, 1H), 7,45-7,51 (m, 2H).
Usando esencialmente el procedimiento descrito en los ejemplos 1 y 2, usando 1-[(1S,3R)-3-[[tertbutil(dimetil)silil]oximetíl]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etenona Isómero 2 (60 mg, 104mmol), da el compuesto base 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2, (42 mg, 87%de rendimiento). ESMS para cada uno(m/z):462 (M+1). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Isómero 1: 6 0,81 (s, 3H), 0,83-0,94 (m, 4H), 1,14-1,26 (m, 5H), 1,28-1,37 (m, 1H), 1,50 (d, 1H), 2,09-2,18 (m, 1H), 2,66-3,05 (m, 2H), 3,27-3,32 (m, 1H), 3,56-3,67 (m, 1H), 4,08-4,32 (m, 2H), 4,39-4,48 (m, 1H), 4,96-5,26 (m, 2H), 7,00-7,16 (m, 3H), 7,33 (t, 1H), 7,48 (d, 2H).
Ejemplos 5 y 6
2-(2,6-Didorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[4,4-difluoro-3-hidroxi-3-metil-butil]-3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 y 2-(2,6-diclorofenil)-1 -[(1S,3R)-5-[4,4-difluoro-3-hidroxi-3-metM-butil]-3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2
Una mezcla de 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[(3R)-4,4-difluoro-3-hidroxi-3-metil-butil]-3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etanona y 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[(3S)-4,4-difluoro-3-hidroxi-3-metil-butil]-3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etanona (493 mg, 0,75 mmol) se disuelve en THF (12 ml). Se agrega una solución 1M de fluoruro de tetrabutilamonio en THF (3 ml, 3 mmol) y la mezcla resultante se agita a RT durante 1 h. La mezcla se diluye con EtOAc y se lava con NaCl acuoso saturado. La capa orgánica se separa, se seca sobre Na2SO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, usando un gradiente de 0-75 % EtOAc en hexanos, para dar una mezcla de la base como espuma de color blanco (342 mg, 97 % de rendimiento) tras la evaporación de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 470 (M+1).
Los dos diastereómeros se purifican y separan mediante SFC quiral (columna CHIRALCEL® OD-H, 21 * 250 mm), eluyendo con metanol:CO2 (15:85) a un caudal de 80 ml/min y temperatura de 40 °C, para dar el Isómero 1 (156 mg, 46 % de rendimiento) y el Isómero 2 (141 mg, 41 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas.
Isómero 1: ESMS (m/z): 470 (M+H). SFC analítico tR: 1,618 min (columna CHIRALCEL® OD-H, 4 * 150 mm, 15 % de metanol/CO2, 5 ml/min, 225 nm).
Isómero 2: ESMS (m/z): 470 (M+H). SFC analítico tR: 2,213 min (columna CHIRALCEL® OD-H, 4 * 150 mm, 15 % de metanol/CO2, 5 ml/min, 225 nm).
Ejemplo 7
2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etanona
Se disuelve 1-((1S,3R)-3-(((íerí-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-5-(3-hidroxi-3-metilbutil)-1 -metil-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6-fluorofenil)etan-1-ona (5,3 g, 7,7 mmol) se disuelve en THF (129 ml) y se agrega una solución 1M de fluoruro de tetrabutilamonio en THF (23 ml, 23 mmol). La mezcla se agita a RT durante 1 h. La mezcla se diluye con EtOAc, se lava con NaCl acuoso saturado y se separan las capas. El extracto orgánico se seca sobre Na2SO4, se filtra, y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 50-100 % de EtOAc en hexanos, para obtener el compuesto base como un sólido de color blanco (2,75 g, 79 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. Es Ms (m/z): 452 (M+1).
Ejemplos 8 y 9
2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 y 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2
Una mezcla de 1 -[(1R,3R)-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetíl]-6-fluoro-5-[trans-2-(1 -hidroxi-1 -metil-etil)ciclopropil]-1 -metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona Isómero 1 y 1-[(1R,3R)-3-[[tertbutil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[trans-2-(1 -hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluorofenil)etanona Isómero 2 (1.1g, 1,5 mmol) se disuelve en THF (10 ml) y la mezcla se enfría a 0 °C. Se agrega gota a gota una solución 1M de fluoruro de tetrabutilamonio en t Hf (3 ml, 3 mmol) y la mezcla de reacción se agita mientras se calienta a RT durante la noche. La mezcla de reacción se diluye con EtOAc y se lava secuencialmente con agua y NaCl acuoso saturado. Las capas resultantes se separan y la capa orgánica se seca sobre MgSO4. se filtran, y el filtrado se concentra a presión reducida El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-100 % de metil fe/f-butiléter en hexanos, para obtener una mezcla de los compuestos base como aceite ámbar (490 mg, 69 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 464 (M+1).
Los dos diastereómeros se purifican y separan adicionalmente mediante SFC quiral (columna PHENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 21 x 250 mm, 20 % de isopropanol/CO2, 80 ml/min, 40 °C) para obtener la 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 (136 mg, 28 % de rendimiento; HPLC analítica tR: 2,769 min) y 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2 (121 mg, 25 % de rendimiento; HPLC analítica tR: 3,368 min) como sólidos de color blanco tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas.
Isómero 1: ESMS (m/z): 464 (M+H). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): 50,94-1,17 (m, 2H), 1,17-1,25 (m, 3H), 1,25-1,44 (m, 4H), 1,60 (s, 3H), 1,80-1,90 (m, 1H), 2,07-2,37 (m, 1H), 2,91-3,23 (m, 3H), 3,47-3,57 (m, 1H), 3,92 (t, J = 16,1 Hz, 1H), 4,05 (s, 2H), 4,42-4,66 (m, 1H), 5,04 (q, J = 7,0 Hz, 0,5 H), 5,21 (q, J = 7,0 Hz, 0,5 H). 6,83-7,09 (m, 3H), 7.19- 7,26 (m, 2H) SCF analítico tR 2,769 min (columna PHENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 4 * 150 mm, 20 % de isopropanol/CO2, 5 ml/min, 225 nm).
Isómero 2: ESMS(m/z):464 (M+H). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): 50,71-0,81 (m, 1H), 1,22 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,33-1,44 (m, 4H), 1,48-1,59 (m, 1H), 1,59-1,69 (m, 2H), 1,69-1,81 (m, 1H), 2,87-3,08 (m, 1H), 3,08-3,31 (m, 1H), 3,47-3,57 (m, 1H), 3,70-3,95 (m, 1H), 3,97-4,11 (m, 2H), 4,43-4,60 (m, 1H), 5,01-5,26 (m, 1H), 6,84-7,08 (m, 3H), 7.20- 7,26 (m, 2H). SFC analítico tR 3,368 min (columna PHENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 4 * 150 mm, 20 % de isopropanol/CO2, 5 ml/min, 225 nm).
Ejemplos 10 y 11
2-(2,6-diclorofenil)-1 -[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-(1 -hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 y 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2
Una mezcla de 1-[(1S,3R)-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona Isómero 1 y 1 -[(1S,3R)-3-[[tert-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona Isómero 2 (333 mg, 0,5 mmol) se disuelve en THF (4,6 ml) y la mezcla se enfría hasta 0 °C. Se agrega gota a gota una solución 1M de solución de fluoruro de tetrabutilamonio en THF (0,50 ml, 0,50 mmol) y la mezcla de reacción resultante se calienta a RT con agitación durante la noche. La mezcla de reacción se diluye con EtOAc y se lava secuencialmente con agua y NaCl acuoso saturado. Las capas se separaron y la fase orgánica se secó sobre MgSO4, se filtra y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 0-100 % de metiltert-butiléter en hexanos, para obtener una mezcla de los compuestos base como aceite ámbar (211 mg, 72 % de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas. ESMS (m/z): 480 (M+1).
Los dos diastereómeros se purifican y se separan adicionalmente por SFC quiral (columna PHENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 21 * 250 mm, 20 % de IPA/CO2, 80 ml/min, 40 °C) para obtener los compuestos base 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 1 (41 mg, rendimiento del 21 %; HPLC analítica tR: 3,095 min) y 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, Isómero 2 (47 mg, 24 % de rendimiento; HPLC analítica tR: 3,793 min) como sólidos de color blanco tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas deseadas.
Isómero 1: ESMS (m/z): 480 (M+H). 1H RMN (400 MHz, CDCh): 50,92-1,07 (m, 2H), 1,20-1,27 (m, 5H), 1,60-1,66 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 1,80-1,90 (m, 1H). 2,93-3,23 (m, 2H), 3,47-3,60 (m, 1H), 3,81-4,00 (m, 1H), 4,23 (s, 2H), 4,44 4,70 (m, 1H), 5,06 (q, J = 6,7 Hz, 0,5 H), 5,23 (q, J = 6,7 Hz, 0,5 H), 6,84-7,04 (m, 2H), 7,16-7,23 (m, 1H), 7,36 (d, J = 8,1 Hz, 2H). SFC analítica tR 3,095 min (columna PHENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 4,6 * 150 mm, 20 % de IPA/CO2, 5 ml/min, 225 nm).
Isómero 2: ESMS (m/z): 480 (M+H). 1H RMN (400 MHz, CDQ3): 50,70-0,83 (m, 1H), 1,09-1,18 (m, 1H), 1,23 (d,J= 6,1 Hz, 1H), 1,32 (s, 3H), 1,35-1,46 (m, 4H), 1,64 (d,J= 6,7 Hz, 2H), 1,69-1,82 (m, 1H), 2,90-3,10 (m, 1H), 3,16 3,37 (m, 1H), 3,50-3,61 (m, 1H), 3,70-4,00 (m, 1H), 4,23 (s, 2H), 4,48-4,63 (m, 1H), 5,09 (q,J= 6,7 Hz, 0,6H), 5,24 (q,J= 6,7 Hz, 0,4H). 6,85-7,05 (m, 2H), 7,15-7,23 (m, 1H), 7,36 (d,J= 8,0 Hz, 2H). SFC analítica tR 3,793 min (columna PHENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 4,6 * 150 mm, 20 % de IPA/CO2, 5 ml/min, 225 nm).
Ensayo PAM del receptor D1 humano
La actividad PAM de los compuestos de la presente invención puede medirse esencialmente como se describe en Svensson et al., An Allosteric Potentiator of the Dopamine D1 Receptor Increases Locomotor Activity in Human D1 Knock-in Mices without Casusing Stereotypy or Tachyphylaxis. J. Pharmacol. Exp. Ther. (2017) 360:117-128.
Más concretamente, las células HEK293 que expresan de forma estable el receptor D1 humano (número de acceso NM 000794) se generan mediante transducción génica utilizando el vector retroviral pBABE-bleo y se seleccionan con Zeocin™ (InvivoGen). Aproximadamente al 80 % de confluencia, las células se cosechan utilizando TrypLE™ Express (Gibco), se suspenden en FBS más 8 % de DMSO y se almacenan en nitrógeno líquido. El día del ensayo, las células se descongelan y se resuspenden en tampón STIM (solución salina equilibrada de Hanks suplementada con 0,1 % de BSA, 20 mM de HEp Es , 500 pM de IBMX y 100 pM de ácido ascórbico).
El compuesto de prueba se diluye en serie (1:2) con DMSO en placas de ensayo (ProxiPlate-384 Plus, PerkinElmer) utilizando dispensación acústica (Labcyte) para proporcionar 20 concentraciones para curvas de respuesta completas. El compuesto de prueba (80 nL) se agrega a 5 pL de tampón STIM que contiene 2000 células, y 5 pL de una solución de dopamina de concentración 2X en tampón STlM que generará una respuesta de nivel EC20 (24 nM en solución madre, o 12 nM final) y una concentración final de DMSO en el pocillo de 0,8 %. Las placas se incuban a temperatura ambiente durante un tiempo total de reacción de 60 min.
La producción de AMPc se cuantifica mediante detección HTRF® (Cisbio) siguiendo las instrucciones del fabricante. Generalmente, se agrega a los pocillos tampón de lisis que contiene criptato anti-cAMP (5 pL) y conjugado D2 (del kit HTRF®)(5pL), se incuban las placas durante 60-90 min adicionales y se detecta la fluorescencia resuelta en el tiempo utilizando un lector de placas EnVision™ (PerkinElmer). Los datos de fluorescencia se convierten en concentraciones de AMPc utilizando una curva estándar de AMPc y analizándolos mediante una ecuación logística no lineal de 4 parámetros (Genedata Screener, versión 13.0.5-standard). Para las curvas concentración-respuesta del modo potenciador, los resultados se expresan como porcentaje de la ventana entre una respuesta a la concentración EC20 de dopamina sola (normalizada al 0 %) y la respuesta máxima a la dopamina (definida por la respuesta a 5 pM de dopamina, concentración final, normalizada al 100 %). Los valores absolutos de EC50 se calculan en base a las respuestas máxima y mínima del agonista de control (dopamina). El % de potenciación (% Superior) se determina a partir de la parte superior ajustada de la curva concentraciónrespuesta. La EC50 absoluta y el % Superior para determinados compuestos del ejemplo se muestran en la siguiente tabla 1:
Tabla 1:
(continuación)
Los valores absolutos de EC50 proporcionados para los compuestos de ejemplo anteriores en la tabla 1 ilustran la potenciación de la señalización del receptor D1 humano en respuesta a la dopamina, e ilustran la actividad de los compuestos de la reivindicación 1 como moduladores alostéricos positivos del receptor D1 de dopamina humano. Los compuestos de ejemplo 1-6, y 8-11 de la presente invención representan compuestos quirales, y como se describe en los ejemplos de la presente memoria, se han fabricado y probado como estereoisómeros individuales. Véanse los ejemplos 1-6, 8-11 y la tabla 1 anterior. Los datos combinados para los estereoisómeros individuales (Abs EC50 que oscila entre 5,6 nM y 86,7 nM para los ejemplos 1-6, 8-11) demuestran que cada estereoisómero individual representa una realización de modulador alostérico positivo D1 de la presente invención. La caracterización y determinación de la estereoquímica absoluta de los estereoisómeros individuales de los ejemplos proporcionados en la presente memoria está dentro de la habilidad de la técnica para el experto, y los procedimientos para tales determinaciones son bien conocidos en la literatura de química medicinal (Véase por ejemplo Chiral Analysis (Segunda Edición) Advances in Spectroscopy, Chromatography and Emerging Methods, 2018). Por ejemplo, las configuraciones absolutas se determinan comúnmente por RMN basándose en el uso de CDA: los derivados diastereoméricos que implican la unión covalente entre el auxiliar quiral y los sustratos enantioméricos adoptan una conformación preferida que puede predecirse basándose en el apantallamiento diferencial que provoca un anillo aromático incorporado al reactivo discriminante quiral.
Generación de ratones con inserción génica de receptores D1 humanos
Un ratón transgénico en el que el receptor murino de dopamina 1 (D1) se sustituye por su homólogo humano puede generarse mediante técnicas estándar (véase en general Svensson et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. (2017) 360:117-128). Por ejemplo, se subclonan fragmentos genómicos de ratón a partir de la biblioteca de cromosomas artificiales bacterianos RP23 y se reclonan en un vector de orientación PGK-neo. El marco abierto de lectura del ratón se sustituye por el marco abierto de lectura del receptor D1 humano en el exón 2. Un marcador de selección neo aguas arriba del exón 2 está flanqueado por sitios frt para su posterior eliminación. El flanqueo del exón 2 por sitios de selección loxP permite la opción de generar ratones con genes desactivados D1 mediante el cruce con ratones que expresan el gen de la nucleasacre.
La línea de células madre embrionarias C57BL/6 N B6-3 se cultiva en una capa alimentadora mitóticamente inactivada de fibroblastos embrionarios de ratón en DMEM de alta glucosa con 20 % de FBS y 2*106 unidades/l de factor inhibidor de leucemia. Se electroporan 10 millones de células madre embrionarias más 30 microgramos de ADN de vector linealizado y se someten a selección G418 (200 pg/ml). Los clones se aíslan y se analizan mediante transferencia Southern.
Un clon que contiene el inserto del tamaño esperado se inserta en blastocistos y los ratones resultantes se genotipan por PCR. Se cruza una quimera macho con una hembra que contiene el gen de la nucleasaflppara eliminar el marcador de selección. La progenie que contiene el receptor humano D1 sin el marcador de selección se identifica mediante PCR. Un macho heterocigoto se aparea con ratones C57BL/6 hembra. Se aparean progenies macho y hembra que contienen el receptor D1 humano y se identifican los homocigotos mediante PCR. El comportamiento y la reproducción de los homocigotos son normales y la colonia se mantiene en el estado homocigoto durante las generaciones siguientes.
Actividad locomotora basal (habituada)
La eficaciain vivode los presentes compuestos puede demostrarse que actúan a través del receptor D1 utilizando la actividad locomotora del ratón. La actividad locomotora se mide mediante un sistema automatizado de seguimiento del movimiento en ratones. El seguimiento de los comportamientos de actividad locomotora de los ratones se realiza en jaulas de plástico transparente con dimensiones de 45 * 25 * 20 cm, con una profundidad de 1 cm de virutas de madera como lecho absorbente, y cubiertas con una tapa de plástico filtrada y ventilada. Las jaulas se colocaron en un marco rectangular que contenía una rejilla de 12 haces de fotocélulas en una configuración de 8 * 4 (Kinder Scientific, Poway, CA) colocada a 2,5 centímetros del suelo de la jaula para la detección de movimientos corporales (deambulaciones) y registrados por ordenador.
Se colocan ratones macho con inserción génica de receptores D1 humanos en cámaras y se les permite habituarse a las cámaras durante 60 min. Durante el periodo de habituación, los ratones muestran una locomoción decreciente con el tiempo, como era de esperar. Tras la administración de un compuesto de la invención, se observa que el movimiento de los animales aumenta en función de la dosis.
Los ratones se asignan aleatoriamente a grupos de tratamiento. En el estudio dosis-respuesta, cada ratón se coloca individualmente en una de las cajas de actividad locomotora durante un periodo de habituación de 60 min. A continuación, se dosifica a los ratones por vía oral utilizando el compuesto de prueba en un vehículo de hidroxipropil-betaciclodextrina al 20 % y utilizando un volumen de dosis de l0 ml/kg. Tras la dosificación, los ratones se vuelven a colocar en las cajas de LMA y se registra el número total de deambulaciones por intervalo de 10 minutos para cada ratón durante un periodo de medición de 60 minutos. El análisis estadístico se lleva a cabo mediante ANOVA unidireccional seguido de análisis post-hoc mediante la prueba de comparación de Dunnett.
El compuesto del ejemplo 7 se ensaya esencialmente como se describió anteriormente y se encontró que aumenta el movimiento basal de una manera dependiente de la dosis (Tabla 2 a continuación).
Tabla 2:
Los datos de actividad locomotora basal para el ejemplo 7 mostrados en la tabla 2 ilustran que los compuestos de la invención, y el ejemplo 7 en particular, son eficaces en la activación locomotora de animales que están habituados al ambiente. Se cree que esta actividad es el resultado de la activación central de los receptores D1 a través de la potenciación alostérica (véase por ejemplo Svensson et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. (2017) 360:117-128). Los datos proporcionados en la tabla 2 para los ejemplos 7 ilustran la eficacia in vivo farmacológicamente ventajosa de los compuestos de la invención para la potenciación de respuestas endógenas mediadas por dopamina. Los datos proporcionados en la tabla 2 para los ejemplos 7, ilustran además la biodisponibilidad oral farmacológicamente ventajosa de los ejemplos 7 y de los compuestos de fórmula I.
Niveles en plasma y cerebro:
Ejemplo 7, 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, se dosificó oralmente a ratones macho de 3 mg/kg a 60 mg/kg en condiciones de alimentación, y se determinó la concentración en plasma y cerebro 1 h después de la dosis. La fracción no unida del compuesto se determinó in vitro como se ha descrito previamente (Zamek-Gliszczynski MJ, et al., Validation of 96-well equilibrium dialysis with non-radiolabeled drug for definitive measurement of protein binding and application to clinical development of highly-bound drugs, J. Pharm. Sci. (2011) 100: 2498-2507). La proporción (Kpuu) de la concentración cerebral no unida (Cu,cerebro) frente a la concertación plasmática no unida (Cu,plasma) se determinó como se ha descrito previamente (Raub<t>J, et al., Brain Exposure of Two Selective Dual<c>D<k>4 and CDK6 Inhibitors and the Antitumor Activity of CDK4 and CDK6 Inhibition in Combination with Temozolomide in an Intracranial Glioblastoma Xenograft.. Drug Metab. Dispos. (2015) 43:1360-71). Los datos presentados a continuación en la tabla 3 para el ejemplo 7 son promedios de 3 animales a cada dosis. "Con." se refiere a la concentración.
Tabla 3:
Dosis Tiempo Con. en plasma Con. en cerebro Cu,plasma Cu,cerebro mg/kg h nMnMfu,plasma fu,cerebro nMnMKpuu
3 1 353 18 0,0141 0,0249 4,97 0,448 0,126
6 1 682 45,1 0,0141 0,0249 9,62 1,12 0,143
10 1 1210 84,9 0,0141 0,0249 17,1 2,11 0,122
30 1 4980 557 0,0141 0,0249 70,1 13,9 0,194
60 1 9080 1290 0,0141 0,0249 128 32,1 0,248
Los compuestos de la invención, por ejemplo, el ejemplo 7, 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etenona, muestran una combinación ventajosa de propiedades farmacológicas, tales como potenciación de la señalización del receptor D1 humano en respuesta a la dopamina, alta disponibilidad oral in vivo, disponibilidad en el sistema nervioso central y eficacia in vivo en la activación locomotora de animales habituados al ambiente. Por ejemplo, el ejemplo 7 demuestra una potenciación de la señalización del receptor D1 humano en respuesta a la dopamina (10,2 ± 1,40 nM (n=15)), y una eficacia in vivo significativa cuando se administra por vía oral a 10, 30 y 60 mg/kg PO, en la activación locomotora de ratones con inserción génica del receptor D1 humano habituados al ambiente, lo que ilustra la biodisponibilidad oral favorable de este compuesto. Además, el ejemplo 7 es generalmente bien tolerado cuando se administra in vivo a ratas normales en un amplio intervalo de dosis, y muestra una ventajosa falta de toxicidad en este experimento in vivo. Por tanto, el ejemplo 7 demuestra una combinación ventajosa de propiedades farmacológicas favorables que apoyan el posible uso como agente terapéutico administrado por vía oral para el potencial del receptor de dopamina D1 en, y el tratamiento de la enfermedad de Parkinson, la esquizofrenia, el ADHD, y/o la enfermedad de Alzheimer.
Determinación de la fracción del compuesto eliminada a través del metabolismo CYP3A4 (fmCYP3A4)
La fracción del aclaramiento global de un fármaco mediante el metabolismo oxidativo por el citocromo P450 (CYP) es una indicación importante de los posibles efectos adversos mediados por la interacción farmacológica en la víctima. (véase en general Ogu, Chris C., and Maxa, Jan L., Drug interactions due to cytochrome P450, BUMC Proceedings 2000; 13:421-423). Cuanto mayor sea la fracción del aclaramiento global de un fármaco determinado que pasa por una vía de oxidación del CYP, en particular exclusivamente a través de un único CYP, como por ejemplo el CYP3A4, mayor será la posibilidad de que el fármaco sea susceptible de sufrir interacciones farmacológicas indeseadas cuando se utiliza en terapia. Para determinar la fmCYP3A4 (la fracción de metabolismo vía CYP3A4), primero se determina la fracción de oxidación mediada por P450, (fmCYP) en hepatocitos humanos. La contribución relativa de la oxidación mediada por CYP3A4 (fmCYP3A4_RCP) sobre otros P450 se determina entonces utilizando un ensayo de fenotipado de CYP recombinante (RCP). La fmCYP3A4 se calcula mediante la siguiente ecuación:
<fm cY P 3 A 4 — fm c Y P>x<fm cY P 3 A 4 RCP>
Determinación de la fracción del metabolismo oxidativo mediado por el citocromo P450 (CYP) (fmcYp) en hepatocitos humanos
La contribución relativa de los P450s en el metabolismo global de un compuesto se determinó a partir del aclaramiento del fármaco en un ensayo utilizando hepatocitos humanos en presencia y ausencia del inhibidor pan P450 1-aminobenzotriazol (ABT). El aclaramiento intrínseco se determinó en hepatocitos humanos criopreservados esencialmente como se describe en McGinnity DF, et al. (2004) Evaluation of fresh and cryopreserved hepatocytes as in vitro drug metabolism tools for the prediction of metabolic clearance. Drug Metab Dispos 32:1247-1253. En general, las incubaciones del ensayo contienen 0,3 pM del compuesto de prueba y 106 células/ml de hepatocitos, con o sin 0,5 h de preincubación con ABT (1 mM). La pérdida de compuesto parental se mide por LC/MS tras 15, 30, 60 y 90 min. de incubación. El aclaramiento intrínseco (pL/min/106 células) se calcula utilizando la siguiente ecuación para ambos ± ABT. La fracción de metabolismo por CYP es el porcentaje de inhibición por ABT.
CL¡,ir' -Jtjq,<x volumen de ¡ncubación/10 ^células,>
en la que kdep, la constante de agotamiento del sustrato (min-1), es la pendiente determinada mediante regresión lineal a partir del % restante transformado logarítmicamente en el eje y frente al tiempo en el eje x (min-1).
Determinación de la fracción del metabolismo mediado por CYP3A4 mediante un ensayo de fenotipado de CYP recombinante (fmnYKw rcp)
La fracción relativa del metabolismo de un compuesto contribuido por un CYP dado, como por ejemplo CYP3A4, del metabolismo total P450 del compuesto puede determinarse como sigue:
Un panel de 9 CYPs recombinantes humanos (rCYPs) proporcionados como Supersomas (BD Gentest, Woburn, M<a>), incluyendo rCYPs 1A2, 2B6, 2C8, 2C9, 2C19, 2D6, 2J2, 3A4, y 3A5, son evaluados para el metabolismo de compuestos (véase generalmente Cannady EA, et al. (2015) Evacetrapib: in vitro and clinical disposition, metabolism, excretion, and assessment of drug interaction potential with strong CYP3A and CYP2C8 inhibitors. Pharmacol Res Perspect 3:e00179). Las incubaciones y los cálculos se realizan esencialmente como se describe en Wickremsinhe<e>R, et al. (2014), Disposition and metabolism of LY2603618, a Chk-1 inhibitor following intravenous administration in patients with advanced and/or metastatic solid tumors. Xenobiotica 44:827-841, excepto que las incubaciones se llevan a cabo durante 2 horas, dada la baja tasa de recambio de los compuestos de prueba. El aclaramiento intrínseco (CLint) en los rCYP se ajusta al microsoma hepático humano (CLintajustado al HLM) según la siguiente ecuación:
CL¡ntescalado porHLM=-taePx(volumen de ¡ncubación/prnol rCYP)xRAF
en la quekdepes la constante de velocidad de agotamiento del sustrato (min-1), pmol rCYP es la cantidad de rCYP específica del lote en la incubación, y el factor de actividad relativa (RAF) es un factor de actividad relativa (pmol/mg) apropiado para el par rCYPs/HLMs. La constante de velocidad se determina internamente por experimento, y la pendiente se determina mediante regresión lineal a partir del % restante transformado logarítmicamente en el eje y frente al tiempo en el eje x (min-1). pmol rCYP y RAF son las constantes suministradas por el vendedor para el supersoma.
La fracción de metabolismo mediado por CYP3A4 (fmoYP3A4_RCP) se determina dividiendo el CLint escalado por HLM de CYP3A4 por la suma del CLint escalado por HLM para cada subtipo de P450 ensayado (Cannady et al., 2015).
Perfil metabólico de los hepatocitos
El perfil metabólico del hepatocito se determina para confirmar la formación de metabolitos mediante vías oxidativas mediadas por P450 y vías no oxidativas mediadas por enzimas de Fase II (por ejemplo, UDP-glucuronosiltransferasas y sulfotransferasas). Se determina en hepatocitos humanos esencialmente descritos en Zhou X, et al. (2016), Difference in the Pharmacokinetics and Hepatic Metabolism of Antidiabetic Drugs in Zucker Diabetic Fatty and Sprague-Dawley Rats. Drug Metab Dispos 44:1184-1192). En resumen, las incubaciones se realizan en una incubadora de CO2 a 37 °C utilizando una placa de 24 pocillos que contiene 250.000 células/pocillo. Se agrega una solución madre del compuesto de prueba al medio para obtener una concentración final de incubación de 2 pM. Las incubaciones, incluidos los medios y las células, se inactivan con un volumen igual de acetonitrilo al cabo de 4 horas. Las muestras se procesan y analizan utilizando LC/MS esencialmente como se presenta en Zhou et al.2016.
Cálculo de la fracción del compuesto eliminada a través del metabolismo CYP3A4 (fmnYKw)
La excreción renal y biliar de los compuestos de prueba se comprueba en perros canulados por el conducto biliar esencialmente según Burkey JL, et al. (2002) Disposition of LY333531, a selective protein kinase C beta inhibitor, in the Fischer 344 rat and beagle dog. Xenobiotica 32:1045-1052. El compuesto del ejemplo 7 se prueba esencialmente como se ha descrito y se comprueba que su excreción renal y biliar es insignificante. La fracción del compuesto eliminada a través del metabolismo CYP3A4 se calcula utilizando la siguiente ecuación:
<fm cYP3A4 - fm cY P>x<fttl3A4_RCP>
donde fmCYP es la fracción de compuesto metabolizado vía CYP medida en el ensayo CLint ± ABT de hepatocitos
fm3A4_RCP es la fracción de compuesto metabolizado vía CYP3A4 en el ensayo de fenotipado de CYP recombinante
Determinación de la fracción que escapa al metabolismo intestinal de primer paso (Fg)
La estimación de la fracción metabolizada en el intestino puede determinarse utilizando la siguiente ecuación encontrada en Yang J, et al. (2007) Prediction of intestinal first-pass drug metabolism. Curr Drug Metab 8:676-684:
F G Q g u t / (Q g u t fU gut X C lin t CYP3A. gu t)
Q g u t — Q v ill i X C lp e n n / (Q v ill i C lp e n n )
Clfng = P4pf x Superficie intestinal
Clin.<CYP3A,>£iil<=>CLi„[,<fYP.u. K>eodo/ñiink-<x proteina microsomal en el intestino (mg) x 0,4 (cálculo interno)>Donde Qgut es un término de flujo híbrido que depende del flujo sanguíneo de las vellosidades y de la permeabilidad del compuesto
fugut es la fracción de fármaco no unido en el enterocito
Qvilli es el flujo sanguíneo de las vellosidades
Clperm es el término de depuración que define la permeabilidad a través del enterocito
Papp es la permeabilidad pasiva medida en la línea celular interna MDCKII
fumic es la fracción de fármaco no unido en microsomas hepáticos humanos
Los parámetros del intestino humano proceden de Yang et al., 2007, y de Gertz M, et al. (2010) Prediction of human intestinal first-pass metabolism of 25 CYP3A substrates from in vitro clearance and permeability data. Drug Metab Dispos 38:1147-1158.
Modelo estático mecanicista para la estimación de la víctima DPI por inhibición de CYP3A4
El cambio potencial en la magnitud de exposición AUC del fármaco de los compuestos de prueba en presencia de itraconazol puede determinarse empleando un modelo estático mecanicista esencialmente como se describe en Han B, et al. (2013) Prediction of CYP3A Mediated Drug-Drug Interactions: Estimation of Gut Wall and Hepatic Contributions. ASCPT Annual Meeting, Indianapolis, IN:
AUCpo.inh/AUCpo = [1/ (A x fm (1-fm))] x [1/ (X x (1-F<g>) F<g>)]
A = 1/ (1 [I]h/Ki)
X=l/(l+[I]gu,/Ki)
Donde fm es la fracción metabolizada por el CYP3A4 hepático
F<g>es la fracción que escapa al metabolismo intestinal en los enterocitos
Ki es la constante de disociación del itraconazol de la enzima
[I]h es la concentración de itraconazol en el hígado
[I]gut es la concentración de itraconazol en el intestino
Los parámetros del itraconazol como inhibidor del CYP3A4 (A= 0,10 y X= 0,10) proceden de Olkkola KT, et al. (1994) Midazolam should be avoided in patients receiving the systemic antimycotics ketoconazole or itraconazole. Clin Pharmacol Ther 55:481-485.
El compuesto de los ejemplos 7, representativo de los compuestos de intervención se prueba esencialmente como se ha descrito anteriormente y se encuentra que se metaboliza principalmente a través de procedimientos no oxidativos en los hepatocitos en oposición al metabolismo oxidativo por P450 (las fracciones metabolizadas por CYPs son del 32,3 %). El compuesto no se examinó en el ensayo RCP, pero se asumió el peor escenario de los casos del 100 % metabolizado por CYP3A4 para predecir la proporción AUC en presencia de intraconazol. la proporción AUC previsto era inferior a 2. Por tanto, se cree que los compuestos de la invención presentan un riesgo mínimo de interacción farmacológica en la víctima a través de cualquier CYP, incluido el CYP3A4 (véase la tabla 4.).
Tabla 4. fmCYP3A4, Fg y proporción AUC predicha para los compuestos del Ej. 7 Compuesto Ej. 7
fmCYP 0,322
fm3A4_RCP 1
fmCYP3A4 0,322
CLint, CYP3A, hígado pl/min/mg 25,5
fumic 0,392
Papp 10-6cm/s 37,9
Fg0,78
Proporción AUC predicha
(con itraconazol) 1,76

Claims (13)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de la fórmula:
    en la que: R1 es
    R2 es -F o -Cl; R3 es -F o -Cl; y R4 es -H o -F; siempre que cuando R1 sea
    entonces R4 sea -F.
  2. 2. El compuesto según la reivindicación 1, de fórmula (II)
    en la que: R1 es
    R2 es -F o -Cl; R3 es -F o -Cl; y R4 es H o F; siempre que cuando R1 sea
    entonces R4 sea -F.
  3. 3. El compuesto según la reivindicación 1, que es:
  4. 4. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 y opcionalmente un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
  5. 5. Una composición farmacéutica según la reivindicación 4 que comprende:
    y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
  6. 6. Una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en un procedimiento de terapia.
  7. 7. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en un procedimiento para el tratamiento de un trastorno dopaminérgico del CNS seleccionado del grupo que consiste en enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, demencia por cuerpos de Lewy (LBD), demencia vascular, esquizofrenia, ADHD, depresión, autismo, dolor musculoesquelético crónico, fibromialgia, trastornos del deterioro cognitivo, trastornos del sueño, somnolencia diurna excesiva, narcolepsia, trastorno por turnos de trabajo, lesión cerebral traumática, encefalopatía traumática crónica, obesidad y regulación del apetito, trastornos del estado de ánimo, letargo, apatía y trastornos de adicción.
  8. 8. Una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en un procedimiento para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
  9. 9. El compuesto para su uso según la reivindicación 8, en el que el compuesto es 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etanona.
  10. 10. Una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en un procedimiento para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.
  11. 11. El compuesto para su uso según la reivindicación 10, en el que el compuesto es 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il]etanona.
  12. 12. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso, en combinación con un precursor de dopamina seleccionado del grupo que consiste en levodopa, melevodopa y etilevodopa, en un procedimiento para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
  13. 13. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso, en combinación con un agonista de dopamina seleccionado del grupo que consiste en pramipexol, ropinirol, apomorfina, rotigotina, bromocriptina, cabergolina y pergolida, en un procedimiento para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
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