CN113150089A - GhMKK6基因及其编码蛋白在棉花矮化育种中的应用 - Google Patents

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CN113150089A CN202110159252.9A CN202110159252A CN113150089A CN 113150089 A CN113150089 A CN 113150089A CN 202110159252 A CN202110159252 A CN 202110159252A CN 113150089 A CN113150089 A CN 113150089A
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    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
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Abstract

本发明公开了GhMKK6基因及其编码蛋白在棉花矮化育种中的应用。本发明提供了一种蛋白质,命名为GhMKK6蛋白,是序列表中序列1所示的蛋白质。编码GhMKK6蛋白的基因也属于本发明的保护范围。本发明还保护GhMKK6蛋白在调控植物株高中的应用。所述应用中,增加GhMKK6蛋白的表达,植物株高降低。本发明还保护一种培育转基因植物的方法,包括如下步骤:将GhMKK6基因导入受体植物中,得到株高降低的转基因植物。本发明在棉花遗传育种上有良好的应用前景。

Description

GhMKK6基因及其编码蛋白在棉花矮化育种中的应用
技术领域
本发明属于生物技术领域,涉及GhMKK6基因及其编码蛋白在棉花矮化育种中的应用。
背景技术
棉花是最重要的经济作物之一,利用棉花生产的产品涉及人们生活的方方面面。此外,随着全球人口数量的增加,对棉花的需求量也进一步提高。如何提高棉花产量 并推动棉花产业发展成为目前棉花种植和加工领域科学研究的重点。
棉花具有无限生长的趋势,传统棉花种植过程中,棉农经常需要通过人工打顶去势的方法,控制棉株主茎高度,调节体内水分、养分等物质的运输方向,从而使较多 的养分供生殖器官生长,减少无效果枝对水肥的徒耗,促进棉株早结铃、多结铃、少 脱落,提高棉花品质。有研究显示,主枝较矮的棉花具有抗倒伏,光能利用率高,适 宜高度密植等特点。人工打顶耗费劳动力较多且效率低下,棉农负担重。因此,如果 能够发现调控棉花生长的相关基因,并用于改良棉花的生长性状,控制植株生长高度, 不仅能有效的节约成本,节省劳动力,同时还有助于实现棉花的机械化管理,促进棉 花产业的健康发展。
发明内容
本发明的目的是提供GhMKK6基因及其编码蛋白在棉花矮化育种中的应用。
本发明提供了一种蛋白质,命名为GhMKK6蛋白,获自陆地棉(Gossypium hirsutumLinn.),是如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4):
(a1)序列表中序列1所示的蛋白质;
(a2)将序列表中序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物株高相关的由其衍生的蛋白质;
(a3)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白;
(a4)来源于棉花且与(a1)具有98%以上同一性且与植物株高相关的蛋白质。
标签具体如表1所示。
表1标签的序列
Figure BDA0002935647630000011
Figure BDA0002935647630000021
编码GhMKK6蛋白的基因也属于本发明的保护范围。
编码GhMKK6蛋白的基因命名为GhMKK6基因。
GhMKK6基因是如下(b1)或(b2)或(b3):
(b1)编码区如序列表中序列2所示的DNA分子;
(b2)在严格条件下与(b1)限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质的DNA分子;
(b3)来源于棉花且与(b1)或(b2)或(b3)限定的DNA分子至少具有70%、 至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具 有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码所述蛋白质的DNA 分子。
所述严格条件是在2×SSC,0.1%SDS的溶液中,在68℃下杂交并洗膜2次,每次5min,又于0.5×SSC,0.1%SDS的溶液中,在68℃下杂交并洗膜2次,每次15min。
含有GhMKK6基因的重组载体、表达盒或重组菌均属于本发明的保护范围。
可用现有的植物表达载体构建含有GhMKK6基因的重组载体。
构建重组载体时,可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子,它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。此外,构 建重组载体时,还可使用增强子,包括翻译增强子或转录增强子,这些增强子区域可 以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等,但必须与编码序列的阅读框相同,以 保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的,可以是 天然的,也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便 于对转基因植物进行鉴定及筛选,可对所用重组载体进行加工,如加入在植物中表达 可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂 标记基因等。从转基因安全性考虑,可不加任何选择性标记基因,直接以表型筛选转 化植物。
所述植物表达载体具体可为载体pRI 201-AN。
所述重组载体具体可为:将载体pRI 201-AN的多克隆位点(例如NdeI和KpnI 酶切位点)之间的小片段取代为序列表的序列2中第4-1065位核苷酸所示的双链DNA 分子得到的重组质粒。
本发明还保护GhMKK6蛋白在调控植物株高中的应用。所述应用中,增加GhMKK6 蛋白的表达,植物株高降低。
本发明还保护GhMKK6基因或含有GhMKK6基因的重组载体或含有GhMKK6基因的 表达盒的应用,为培育株高降低的转基因植物。
本发明还保护一种培育转基因植物的方法,包括如下步骤:将GhMKK6基因导入 受体植物中,得到株高降低的转基因植物。GhMKK6基因具体通过含有GhMKK6基因的 重组载体导入受体植物。
本发明还保护一种植物育种方法,包括如下步骤:增加目的植物中GhMKK6蛋白 的含量和/或活性,从而使植物株高降低。
以上任一所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
以上任一所述植物为锦葵科植物。
以上任一所述植物为棉属植物。
以上任一所述植物为陆地棉。
以上任一所述植物为棉花。
以上任一所述植物为棉花品种(系)R15。
本发明中,发明人构建包含GhMKK6基因CDS的过表达载体,通过农杆菌介导的下胚轴转化法得到稳定遗传的GhMKK6基因过表达棉花株系。在温室种植和田间种植中, 过表达GhMKK6基因的转基因棉花植株具有显著矮化的表型。细胞形态学分析发现,过 表达GhMKK6基因的转基因植株叶片中的细胞数目显著减少。光学显微镜和透射电镜观 察发现,过表达GhMKK6基因的转基因植株中的茎尖生长点亚显微结构没有发生改变, 但分生区细胞数目明显减少。以上结果表明,GhMKK6蛋白可能通过影响分生区细胞数 目,调控棉花生长发育。超表达GhMKK6基因可以使棉花主枝变矮,在棉花遗传育种上 有良好的应用前景。
附图说明
图1为温室中培养3周后的植株照片。
图2为温室中培养3周后的株高统计结果。
图3为大田中培养2个月后的植株照片。
图4为显微镜下观察叶片细胞的照片。
图5为叶片单位面积下显微细胞数目统计图。
图6为茎尖生长点在光学显微镜下的照片。
图7为茎尖生长点在透射电镜下的照片。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐明本发明,而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域 普通技术人员进行进一步改进的指南,并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,按照本领域内的文 献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等, 如无特殊说明,均可从商业途径得到。实施例中所用的野生型棉花指的是棉花品种(系)R15,又称为陆地棉R15,用WT表示。棉花GhMKK6蛋白如序列表的序列1所示。 将编码GhMKK6蛋白的基因命名为GhMKK6基因。棉花cDNA中,GhMKK6基因的开放阅 读框如序列表的序列2所示。
实施例1、
一、构建重组质粒
1、以序列表的序列2所示的双链DNA分子为模板,采用2K6-PRI-5和2K6-PRI-3 组成的引物对进行PCR扩增,回收PCR扩增产物。
2K6-PRI-5:5’-CATATGAAGAGCAAGAAGCCATTGAAGC-3’;
2K6-PRI-3:5’-GGTACCTTATCTTGGGTAATTCACAGG-3’。
2、取步骤1得到的PCR扩增产物,采用限制性内切酶NdeI和KpnI进行双酶切, 回收酶切产物。
3、取载体pRI 201-AN,采用限制性内切酶NdeI和KpnI进行双酶切,回收约10000bp左右的载体骨架。
4、将步骤2得到的酶切产物和步骤3得到的载体骨架连接,得到重组质粒pRI 201-GhMKK6。根据测序结果,对重组质粒pRI 201-GhMKK6进行结构描述如下:将载体 pRI 201-AN的NdeI和KpnI酶切位点之间的小片段取代为了序列表的序列2中第 4-1065位核苷酸所示的双链DNA分子。
二、制备转基因植株
1、将重组质粒pRI 201-GhMKK6导入农杆菌LBA4404,得到重组农杆菌;将重组 农杆菌单菌落接种于含100.0mg/L卡那霉素、50.0mg/L利福平的LB液体培养基, 28.0℃、180-200rpm振荡培养至OD600=0.3-0.5,然后28.0℃、3600rpm离心10min, 收集菌体沉淀,用等体积1/2MS液体培养基重悬浮,然后28.0℃、160rpm振荡培养 30min。
2、取野生型棉花的成熟种子,用剪刀剥取完整的种仁,在无菌条件下将种仁用0.1%HgCl2水溶液浸泡4-5min,然后用灭菌双蒸水冲洗3-5遍,然后将种仁置于装有 MS0培养基的试管中(每个试管2粒种仁),培养一周。培养条件:27±1℃,16h光照 /8h黑暗。
MS0培养基:含2.2g/L MS、30g/L蔗糖、5.5g/L琼脂,用ddH2O定容;pH=6.0。
3、完成步骤2后,在无菌条件下,用镊子取下胚轴,再用手术刀切成0.5cm小段, 即为下胚轴切段。
4、无菌条件下,将步骤3得到的下胚轴切段浸没至步骤1得到的菌液中,轻轻摇 动3min,然后滤去菌液,再用无菌滤纸将下胚轴切段上多余的菌液吸干,然后将下胚 轴切段平铺于共培养培养基上,培养2天。培养条件:28.0℃、黑暗。
共培养培养基:含4.4g/L MS、30g/L葡萄糖、0.1mg/L KT、0.1mg/L 2,4-D、2.0g/LMgCl2·6H2O、2.0g/L植物凝胶,用ddH2O定容;pH=6.0。
5、完成步骤4后,将下胚轴切段转移至抗性愈伤组织诱导培养基,培养约3周。 培养条件:27±1℃,16h光照/8h黑暗。培养过程中,下胚轴两端产生愈伤组织,培养 结束时,愈伤组织长到直径约2-3cm。
抗性愈伤组织诱导培养基:含4.4g/L MS、30g/L葡萄糖、0.1mg/L KT、0.1mg/L 2,4-D、2.0g/L MgCl2·6H2O、500mg/L头孢霉素、50mg/L卡那霉素、2.0g/L植物凝胶, 用ddH2O定容;pH=6.0。
6、完成步骤5后,切取愈伤组织,接种至抗性愈伤组织诱导培养基,培养至愈伤 组织块直径达到7-8cm。培养条件:27±1℃,16h光照/8h黑暗。
7、完成步骤6后,将愈伤组织块转移至胚性愈伤诱导培养基,培养至出现黄绿色或灰绿色,米粒状的胚性愈伤。培养过程中,每个月采用相同培养基继代一次,约继 代2-6次。培养条件:27±1℃,16h光照/8h黑暗。
胚性愈伤组织诱导培养基:含4.4g/L MS、30g/L葡萄糖、1.9g/L KNO3、2.0g/LMgCl2·6H2O、2.5g/L植物凝胶,用ddH2O定容;pH=6.0。
8、完成步骤7后,将胚性愈伤组织转移至分化培养基中,培养至形成植株。培养 过程中,每3-4周继代一次。培养条件:27±1℃,16h光照/8h黑暗。培养过程中, 可以观察到胚性愈伤组织先形成胚状体,然后形成植株。
分化培养基:含30g/L葡萄糖、1.9g/L KNO3、0.5g/L天冬酰胺、1.0g/L谷氨酰 胺、2.0g/L MgCl2·6H2O、2.5g/L植物凝胶的MSB-NH2NO3培养基,pH=6.0。
MSB-NH2NO3培养基配方见表2。
表2
Figure BDA0002935647630000051
Figure BDA0002935647630000061
9、将步骤8中发育完整且根系发达的植株(即T0代再生植株)转移至装有培养 基质的花盆中,待其生长茁壮后移栽至大田。
10、从T0代植株中筛选转基因植株。
11、T0代转基因植株自交并收获种子,即为T1代种子,T1代种子长成的植株即为 T1代植株。
12、从T1代植株中筛选转基因植株。
13、T1代转基因植株自交并收获种子,即为T2代种子,T2代种子长成的植株即为 T2代植株。
14、从T2代植株中筛选转基因植株。
15、将两株T2代转基因植株分别命名为OE2植株和OE3植株。
步骤10、步骤12和步骤14中筛选转基因植株的方法均为:提取总RNA并反转录 得到cDNA,采用2K6-5和2K6-3组成的引物对进行实时定量PCR,靶基因相对丰度为 野生型植株的100倍以上的植株判断为转基因植株。转基因植株又称为过表达植株。
2K6-5:CCTATCTCTTCTTTCTTGACGGCG;
2K6-3:CTTCAAGGCAAACAATCTTCCAACC。
三、株高鉴定
供试种子:野生型棉花种子,OE2植株自交得到的种子,OE3植株自交得到的种子。
1、将供试种子播种于装有潮湿土壤的花盆中,在温室中培养。
培养条件:27±1℃;光周期为16h光照/8h黑暗;相对湿度60%-75%。
种子出苗后,筛选转基因植株(方法同步骤二)。
培养3周后的照片见图1。
株高统计结果见图2(纵坐标单位为cm)(3次独立重复实验,每次统计15株棉 花植株株高的平均值)。
图1和图2中,WT代表野生型棉花种子长成的植株,OE2代表OE2植株自交得到 的种子长成的转基因植株,OE3代表OE3植株自交得到的种子长成的转基因植株。
2、将供试种子播种于田间,进行正常的栽培管理。
种子出苗后,筛选转基因植株(方法同步骤二)。
播种2个月后的植株照片见图3。
图3中,WT代表野生型棉花种子长成的植株,OE2代表OE2植株自交得到的种子 长成的转基因植株,OE3代表OE3植株自交得到的种子长成的转基因植株。
步骤1和步骤2的结果表明,与野生型棉花植株相比,转基因植株具有明显矮化 的表型。
四、真叶细胞数目鉴定
供试叶片:步骤三的1中培养3周的野生型棉花植株的真叶,步骤三的1中培养 3周的OE2植株自交得到的种子长成的转基因植株的真叶,步骤三的1中培养3周的 OE3植株自交得到的种子长成的转基因植株的真叶。选取生长状态相近的真叶。
数据以3个独立实验的平均标准差表示,其中每个实验包含15株独立植株作为生物学重复。固定液:乙醇、乳酸、甘油按3:1:1体积比混合。
脱色:(1)将棉花真叶放于配制好的加热至煮沸的固定液中,处理10min;(2) 将完成步骤(1)的棉花真叶转移至新鲜的固定液中,室温处理过夜。
显微观察:取脱色后的棉花真叶,制片,然后置于显微镜下观察。
照片见图4(比例尺为50μm)。
单位面积下显微细胞数目统计图见图5。
图4和图5中,WT代表野生型棉花种子长成的植株,OE2代表OE2植株自交得到 的种子长成的转基因植株,OE3代表OE3植株自交得到的种子长成的转基因植株。
结果表明,与野生型棉花植株相比,转基因棉花植株的叶片中细胞数目显著减少。
五、茎尖生长点的形态学观察
供试茎尖:步骤三的1中培养3周的野生型棉花植株的茎尖,步骤三的1中培养 3周的OE2植株自交得到的种子长成的转基因植株的茎尖,步骤三的1中培养3周的 OE3植株自交得到的种子长成的转基因植株的茎尖。
固定:首先把茎尖浸入预冷的4%戊二醛中,抽真空30min后,放于4℃冰箱过夜;第二天用磷酸缓冲液冲洗5次(4℃),每次30min;再将茎尖投入1%锇酸固定液中固 定5h,然后用磷酸缓冲液冲洗5次(4℃),每次30min。
脱水:完成固定后,将茎尖依次浸入45%、55%、70%、85%、95%、100%的乙醇中使其脱水,每级处理1小时;然后再用100%乙醇脱水4h,重复一次。
透明:完成脱水后,将茎尖转入环氧丙烷溶液中处理2次,每次4-7h。
浸树脂:完成透明后,取茎尖,先用树脂:环氧丙烷(1:1)混合液处理过夜,再 用树脂处理12h,重复一次,最后加入含DMP-30(2,4,6-三氨基苯酚)的树脂,处 理过夜。
包埋:完成浸树脂后,将材料包埋到包埋板上,依次放入36℃烘箱干燥12h,45℃烘箱干燥12h,60℃烘箱干燥36h。
切片:用LEICARM2265切片机切片,切片厚度2μm,放在42℃展片台展片,用甲 苯胺蓝染色3-4分钟。
分别利用光学显微镜和透射电镜(JEM-1200EX)观察棉花茎尖生长点的发育状况。
光学显微镜下的照片见图6。与野生型棉花植株相比,转基因棉花植株分生区细胞数目显著减少。
透射电镜下的照片见图7。与野生型棉花植株相比,转基因棉花植株生长点的分生区细胞亚显微结构没有发生改变。
图6和图7中,WT代表野生型棉花种子长成的植株,OE2代表OE2植株自交得到 的种子长成的转基因植株,OE3代表OE3植株自交得到的种子长成的转基因植株。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说,在不脱离本发明的宗旨 和范围,以及无需进行不必要的实验情况下,可在同等参数、浓度和条件下,在较 宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例,应该理解为,可以对本发 明作进一步的改进。总之,按本发明的原理,本申请欲包括任何变更、用途或对本 发明的改进,包括脱离了本申请中已公开范围,而用本领域已知的常规技术进行的 改变。按以下附带的权利要求的范围,可以进行一些基本特征的应用。
序列表
<110> 山东农业大学
<120> GhMKK6基因及其编码蛋白在棉花矮化育种中的应用
<130> GNCYX210541
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 354
<212> PRT
<213> Gossypium hirsutum Linn.
<400> 1
Met Lys Ser Lys Lys Pro Leu Lys Gln Leu Lys Leu Ala Val Pro Ala
1 5 10 15
Gln Glu Thr Pro Ile Ser Ser Phe Leu Thr Ala Ser Gly Thr Phe His
20 25 30
Asp Gly Asp Leu Leu Leu Asn Gln Lys Gly Leu Arg Leu Ile Ser Glu
35 40 45
Glu Lys Glu Ser Arg Pro Ser Asp Ala Lys Glu Leu Asp Phe Glu Phe
50 55 60
Ser Leu Glu Asp Leu Glu Thr Ile Lys Val Ile Gly Lys Gly Ser Gly
65 70 75 80
Gly Val Val Gln Leu Val Arg His Lys Trp Val Gly Arg Leu Phe Ala
85 90 95
Leu Lys Val Ile Gln Met Asn Ile Gln Glu Glu Ile Arg Lys Gln Ile
100 105 110
Val Gln Glu Leu Lys Ile Asn Gln Ala Ser Gln Cys Ser His Val Val
115 120 125
Val Cys Tyr His Ser Phe Tyr His Asn Gly Ala Ile Ser Leu Val Leu
130 135 140
Glu Tyr Met Asp Arg Gly Ser Leu Ala Asp Val Ile Arg Gln Val Asn
145 150 155 160
Thr Ile Leu Glu Pro Tyr Leu Ala Val Val Cys Lys Gln Val Leu Gln
165 170 175
Gly Leu Val Tyr Leu His His Glu Arg His Val Ile His Arg Asp Ile
180 185 190
Lys Pro Ser Asn Leu Leu Val Asn His Lys Gly Glu Val Lys Ile Thr
195 200 205
Asp Phe Gly Val Ser Ala Met Leu Ala Ser Ser Met Gly Gln Arg Asp
210 215 220
Thr Phe Val Gly Thr Tyr Asn Tyr Met Ser Pro Glu Arg Ile Ser Gly
225 230 235 240
Ser Thr Tyr Asp Tyr Ser Ser Asp Ile Trp Ser Leu Gly Met Val Val
245 250 255
Leu Glu Cys Ala Ile Gly Arg Phe Pro Tyr Met Gln Ser Glu Asp Gln
260 265 270
Gln Ser Trp Pro Ser Phe Tyr Glu Leu Leu Glu Ala Ile Val Glu Lys
275 280 285
Pro Pro Pro Thr Ala Pro Ser Asp Gln Phe Ser Pro Glu Phe Cys Ser
290 295 300
Phe Val Ser Ala Cys Ile Lys Lys Asn Pro Lys Glu Arg Ala Ser Ser
305 310 315 320
Leu Asp Leu Leu Ser His Pro Phe Ile Arg Lys Phe Glu Asp Lys Asp
325 330 335
Ile Asp Leu Gly Ile Leu Val Gly Ser Leu Glu Pro Pro Val Asn Tyr
340 345 350
Pro Arg
<210> 2
<211> 1065
<212> DNA
<213> Gossypium hirsutum Linn.
<400> 2
atgaagagca agaagccatt gaagcaactg aagctcgctg ttccagctca agaaacccct 60
atctcttctt tcttgacggc gagtgggaca tttcatgatg gcgatttgct tctaaatcag 120
aaaggattgc gtcttatttc cgaggaaaag gaatctcgac cttctgacgc caaggagctt 180
gattttgaat tctcattgga agacctagag acaatcaaag ttattgggaa gggcagtggt 240
ggtgtagtac aacttgttcg ccacaaatgg gttggaagat tgtttgcctt gaaggtcatc 300
caaatgaaca tacaagaaga aattcgcaag caaattgtgc aggagctaaa aataaaccaa 360
gcatcacaat gttcgcatgt tgtagtttgc taccattctt tctatcacaa tggggccata 420
tctctggtgc tagaatacat ggaccgtgga tctctggccg atgtgatcag acaagttaac 480
acaattcttg aaccatatct tgcagttgtg tgtaagcagg ttctacaggg acttgtgtat 540
ttgcaccatg aaaggcacgt aatacatagg gacataaaac catccaatct actggtaaac 600
cataaagggg aagtgaagat cactgatttt ggtgtcagtg caatgctagc tagctctatg 660
ggccagagag atacatttgt tgggacttac aactacatgt cgccggagag gattagtggg 720
agcacttatg actatagcag tgatatttgg agtttgggaa tggtagtgct tgaatgtgct 780
attggacgtt tcccatatat gcaatctgaa gatcaacaaa gctggcctag cttttatgag 840
cttttggagg caatagtgga aaagcctcca ccaactgctc catcagatca attctctcca 900
gagttctgtt catttgtatc agcctgcata aagaagaacc ctaaagaaag agcatcatct 960
ttggacctct tgagtcaccc tttcatcaga aagttcgaag acaaggacat agaccttggg 1020
attttggtag gtagcttgga acctcctgtg aattacccaa gataa 1065

Claims (9)

1.一种蛋白质,是如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4):
(a1)序列表中序列1所示的蛋白质;
(a2)将序列表中序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物株高相关的由其衍生的蛋白质;
(a3)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白;
(a4)来源于棉花且与(a1)具有98%以上同一性且与植物株高相关的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白质的基因。
3.如权利要求2所述的基因,其特征在于:所述基因是如下(b1)或(b2)或(b3):
(b1)编码区如序列表中序列2所示的DNA分子;
(b2)在严格条件下与(b1)限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质的DNA分子;
(b3)来源于棉花且与(b1)或(b2)或(b3)限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组载体、表达盒或重组菌。
5.权利要求1所述蛋白质在调控植物株高中的应用。
6.权利要求2或3所述基因或权利要求4所述重组载体或权利要求4所述表达盒的应用,为培育株高降低的转基因植物。
7.一种培育转基因植物的方法,包括如下步骤:将权利要求2或3所述基因导入受体植物中,得到株高降低的转基因植物。
8.一种植物育种方法,包括如下步骤:增加目的植物中权利要求1所述蛋白质的含量和/或活性,从而使植物株高降低。
9.如权利要求5或6所述的应用或如权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
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